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课件网) 家 运输工具 A T 磷酸二酯键 G C 手术刀 T A 抗虫基因 缝合针 图1抗虫棉（左侧为对照） 图2双链DNA结构和 磷酸二酯键位置 G AATTC GAATTC ① EcoR I CTTAA G CTTAAG C C GGG CCCGGG ② G GGGCCC 拟核DNA 质粒 大肠杆菌细胞 氨苄青霉素 目的基因 抗性基因 插入位点 复制 原点 AmpR 进入受 在含有氨苄青霉素 体细胞 的培养基上培养 只有含有载体，并 含有氨苄青 且载体上的基因表 霉素抗性基 大肠杆菌中有的 达的大肠杆菌才能 因的质粒 有载体进入，有的 存活并增殖 没有载体进入 Amp Amp R Amp Amp R orl ort ort orl Tet R Tetr Tet R Tet R .. A B C D 取材、 取30g洋葱→切碎放入研体>倒人10mL 研磨 充分研磨 过滤后取滤液→4℃冰箱放置→离心 过滤 取 上清液加入体积相等的、预冷的 溶 析出 液>静置2~3min>用玻璃棒卷起丝状物 取两支试管，各加入 溶液 5mL将丝状物溶于其中一支试管→各 鉴定 加人4mL的 试剂沸水浴加热 5min>冷却比较溶液颜色的变化 各加4mL二苯胺试剂 95%酒精 试管1 试管2 (冷却，50m) 溶液b DNA溶液 丝状物 溶液a 图1 图2 leu2 BamHIl BamHII BglⅡ BamHl 质粒X Y (2800bp) -AGATCT-GGATCC- -TCTAGA-一CCTAGG- 目的基因Y (500bp) BglⅡ和BamII I的 (包含KunR) BglⅡ 识别序列及酶切位点 图1 图2 图3
