2021-2022学年高二下学期生物人教版选修3-2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体课件(共19张PPT)

(课件网) 专题二 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 血浆疗法治疗新冠病人，实际上是利用血浆里面的哪种物质？ 康复患者血浆里只有针对新冠病毒的一种抗体么？这种抗体一定足够多么？ 血浆疗法有哪些缺陷？ 产量低、纯度低、得到的抗体特异性差 怎样大量获得针对新冠病毒的抗体呢？ 每一个浆细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体。 如果利用单个浆细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体———单克隆抗体。 在体外培养的条件下，一个浆细胞能无限增殖形成细胞群吗？ 什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？ 浆细胞能够产生特异性抗体，癌细胞能够无限增殖，我们可以怎么做？ 植物体细胞杂交过程 植物细胞 A（白菜） 植物细胞 B（甘蓝） 原生质体 A 原生质体 B 1.去除细胞壁 2.原生质体融合 杂种植株(白菜-甘蓝) 愈伤组织 杂种细胞 纤维素酶、果胶酶 物理方法和 化学药剂:聚乙二醇 杂种细胞再生出细胞壁 植物组织培养 植物细胞融合 植物体细胞杂交技术 脱分化 再分化 一、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 动物细胞融合前需要去壁么？怎样获得单个动物细胞？ 动物细胞融合的诱导方法有哪些？跟植物细胞工程方法完全一致么？ 动物细胞融合的原理是什么？ 不需要，用胰蛋白酶使细胞分散 离心振动电激(物理方法) 聚乙二醇(化学方法) 灭活病毒(生物方法) 细胞膜的流动性 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合） 什么是灭活的病毒？（阅读P52页生物技术资料卡） 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 把两个不同的动物细胞放在一起，用灭活的病毒处理细胞，它们先发生质融合，再出现核融合，进而形成杂交细胞。 融合后的杂交细胞经过有丝分裂后仍能形成两个完整的杂交细胞 任何一项技术的发明，都不是凭空产生的，必定有个发展的过程，让我们阅读课本P52中的小字来了解动物细胞融合的发展简史。并思考：实现动物细胞融合有什么意义呢？又有哪些应用？ 怎样解决短时间内获得针对新冠病毒抗体这一问题？ 如果你是研发人员，你的具体思路是什么？小组讨论三分钟 二、单克隆抗体 向动物注射灭活的新冠病毒 取其体内的B淋巴细胞 取骨髓瘤细胞，诱导融合 此时进行诱导融合的培养基内可能有多少种细胞？如何将其区分开？ 5种（B—B;B—瘤;瘤—瘤;B细胞;瘤细胞） 利用选择培养基筛选杂交瘤细胞 将单个杂交瘤细胞单独培养并克隆，筛选可大量产生所需抗体的杂交瘤细胞（克隆化培养+抗体检测） 体外培养或在小鼠腹腔内增殖，获得大量单克隆抗体 单克隆抗体 诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 第一次筛选：利用选择培养基，排除“杂交瘤细胞”之外的细胞类型 第二次筛选：利用多孔培养板进行细胞培养，并进行抗体检测，筛选出可大量产生目标抗体的杂交瘤细胞 获得所需的单克隆抗体 科勒 米尔斯坦 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理方法 诱导方法 用途 克服远源杂交的障碍，获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞增殖 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法 （同左） 制备单克隆抗体 灭活的病毒 三、 ... ...