动物的克隆

课件46张PPT。第三节 动物的克隆1、动物细胞全能性的特点？ 随着细胞分化程度的提高而全能性逐渐受到限制，分化潜能变窄。细胞核仍具有全能性。 2、离体的植物细胞和组织可以通过组织培养技术克隆成完整的植株，那么动物细胞和组织能否也进行同样的克隆？ 不能，动物细胞的全能性受到限制，到现在为止将离体的动物细胞直接克隆成个体还很困难，所以动物细胞和组织不能进行与植物一样的个体克隆。动物细胞的培养和 克隆形成机械消化或者胰酶消化一、动物细胞、组织培养1、什么方法取得离体的单个动物细胞？2、离体的动物细胞能否正常的生活、表现出正常的生命活动？ 能，在人工控制的培养条件下，生长、分裂乃至接触抑制和衰老、死亡等，并呈现一定的组织特性。3、是不是所有的动物细胞都能在离体的情况下表现出生命活动？1、幼嫩细胞（如：动物胚胎或幼龄动物组织、器官） 2、含全部营养物质的液体培养基和适宜的环境条件。（胰蛋白酶）动物细胞培养：体外培养分散后的单个细胞，使其得以生存，并保持生命活动现象。像体内一样呈现一定的组织特性。动物组织培养：体外培养动物组织，使其维持生活状态或生长特性。可以伴随组织分化，但最终成为细胞培养。动物器官培养：体外培养动物器官原基、部分或整个器官，使之得以保存、生长。保持器官的结构、功能及分化能力。 组织培养7.1951年，海拉细胞系的建成。6.1950年，人工培养液“199”研制成功1.1885年，鸡神经板在生理盐水中培养成活。2.1903年，皮肤及白细胞在腹水及血清中存活一个月，且观察到细胞分裂。3.1907年，蛙胚神经管在蛙淋巴液中悬浮培养，成功看到神经末端的阿米巴运动。4.1912年，鸡胚浸出液对鸡胚心脏组织块进行原代培养和传代培养。5.1943年，获得长期培养细胞系（可连续传代）和细胞克隆。“组织培养”一词产生真正的组织培养开始； 创立了悬浮培养法成功进行了传代培养； 发明了卡氏瓶； 标志着组织培养工作进入全新阶段 二、动物组织培养技术的发展2、适宜的环境条件 无菌、无毒环境：加抗生素，定期更换培养液 适宜的温度和pH值：温度：36.5±0.5 ℃ pH值：7.2-7.4 适宜的气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2） 适宜的渗透压等（一）培养条件 三、动物细胞培养过程成分：无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素和动物血清等1、含全部营养物质的培养液（二）培养过程 从动物胚胎或幼龄动物组织切片中取小片样品转入特殊培养液 原代培养分装到多个卡氏瓶中 传代培养单个细胞悬浮液细胞系机械消化或胰酶消化 （胰蛋白酶）（二）培养过程 动物组织细胞间隙中含有一定量的胶原纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。原代培养物 二氧化碳培养箱 通过在培养箱内模拟形成一个类似细胞或组织在生物体内的生长环境，如恒定的pH值（7.2-7.4）、稳定的温度（37°C）、较高的相对湿度（95%）、稳定的CO2水平（5%），来对细胞或组织进行体外培养的一种装置。?离体动物细胞的生长特性：（1）贴壁生长： 悬浮液中分散的细胞紧贴培养瓶内壁才能生长。 （2）接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂。 （3）正常的生命活动： 生长、分裂、有规律的衰老、死亡等现象，但不分化。细胞贴壁过程 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止。接触抑制如何界定原代培养和传代培养？为什么要传代培养？细胞悬浮液为什么？ 如果不进行传代培养，就会因细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭，不能正常生长。原代培养物细胞系：可连续传代的细胞 原代培养物在首次传代时就成为细胞系。能连续培养的 连续细胞系不能连续培养的 有限细胞系四、细胞系、细胞株 （二倍体细胞） ... ...