课件92张PPT。选修 1 第一部分 微生物的利用考点 一 培养基及无菌技术 培养基 (1)概念:由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质人工配制而成的基质。(2)类型:(3)培养基的成分: 包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2. 无菌技术 (1)实验操作过程中，应从以下几个方面注意避免外来杂菌的污染: ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁、消毒。 ②将用于微生物培养的实验用具和培养基等进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。(2)消毒和灭菌:【高考警示】 不同器具选用的灭菌方法不同 (1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。 (2)培养基、无菌水、玻璃器皿等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。 (3)表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。考点 二 大肠杆菌的培养和分离 1. 培养和分离实验步骤2. 保存菌种 用接种环取出单菌落，用划线法接种在斜面上，37 ℃培养 24 h后，置于4 ℃冰箱中保存。 3. 分离大肠杆菌的方法 (1)划线分离法(方法简单易操作):通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面(也是分离纯化的方法)。在第一次划线后都从上次划线末端开始，目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。(2)涂布分离法(操作复杂，单菌落更易分开):将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。【高考警示】 划线分离法中接种环的使用注意事项 (1)划线分离操作第一次划线及划线结束后需灼烧接种环，其目的不同:(2)灼烧接种环后，需要等接种环冷却才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。考点 三 分离以尿素为氮源的微生物 1. 实验原理 (1)以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌时，只有含有脲酶的细菌能够正常生长，据此可分离出以尿素为氮源的微生物。 (2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3，使pH升高，使酚红指示剂变红。2. 实验步骤 制备培养基:将已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基分别 倒入两个培养皿中，摇匀，平放至凝固。制备细菌悬液:用1 g土样配制不同浓度的细菌悬液。用涂布分离法分离细菌:将不同浓度的土壤稀释液分别加入到 有LB培养基和尿素培养基的培养皿中，并用玻 璃刮刀涂布到整个平面上。培养:倒置培养皿，在37 ℃恒温箱中培养24 h～48 h。观察:培养基中菌落数量。3. 实验分析 (1)样品稀释: ①稀释原因:样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。 ②稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30～300之间,便于计数。(2)与涂布平板有关的问题: ①平板倒置的原因:平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 ②防止培养基外溅:在倒平板的过程中，不能将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。③涂布器的灭菌:玻璃刮刀用70%酒精消毒，取出时，多余酒精在烧杯中滴尽，沾有少量酒精的玻璃刮刀在酒精灯火焰上引燃。 (3)设置对照:可排除实验中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。【思维拓展】 常见选择培养基的用途不同 (1)加高浓度食盐:用于筛选获得金黄色葡萄球菌。 (2)加青霉素:用于筛选获得真菌(酵母菌和霉菌)，原理是青霉 ... ...
~~ 您好，已阅读到文档的结尾了 ~~
