5.1DNA的粗提取与鉴定课件2021-2022学年高二下学期生物人教版选修1(共22张PPT)

(课件网) 专题5 DNA和蛋白质技术 课题1 DNA的粗提取与鉴定 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 课题3 血红蛋白的提取与分离 课题1 DNA的粗提取与鉴定 温故知新 (3)DNA的结构模型是什么 (1)细胞生物的遗传物质是什么？ (2)真核细胞DNA的存在场所 DNA 反向平行的双螺旋结构 主要存在于细胞核，在叶绿体、线粒体中也有少量分布。 实验思路 DNA的提取和鉴定 DNA从哪儿提取？ 怎样将DNA与细胞中 的其他物质分离？ 怎样鉴定我们提取的DNA？ 哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核。 01 实验材料的选取 动物 哺乳动物 卵生动物 哪一种材料更适合用来提取DNA 植物 组织细胞 血细胞 （1）动物细胞 在鸡血细胞溶液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液。 02 破碎细胞，获取含DNA的滤液 使细胞吸水涨破，释放DNA。 加速细胞膜和核膜的破裂，释放DNA （1）动物细胞 在鸡血细胞溶液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液。 02 破碎细胞，获取含DNA的滤液 注意：为防止血液凝固，需加入柠檬酸钠。 使细胞吸水涨破，释放DNA。 加速细胞膜和核膜的破裂，释放DNA 03 去除滤液中的杂质 利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。 【方案一】 溶解度：在一定温度下，某固体物质在100g溶剂里达到饱和状态时所溶解的质量。 基础知识———DNA的溶解性 DNA溶解度最小 O 蛋白质溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L O DNA溶解度 NaCl浓度 0.14mol/L 2mol/L 蛋白质溶解度最大 04 DNA的析出与鉴定 加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95％）、静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。 DNA的析出： 一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解； 二是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物并用滤纸吸去上面的水分。 注意： 动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂 实验组：含DNA的5ml 2mol/L NaCl 和4ml二苯胺 对照组：不含DNA的5ml 2mol/L NaCl 和4ml二苯胺 蓝色的深浅与溶液中DNA的含量多少有关。 DNA的鉴定： 02 破碎细胞，获取含DNA的滤液 （2）植物细胞 需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解，并进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集滤液。 溶解细胞膜，有利于DNA的释放。 有利于DNA的溶解 加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。 课堂练习： 1.判断正误： (1)可选人血细胞作为提取DNA的材料(　　) (2)随着NaCl溶液浓度的升高，DNA在其中的溶解度先升高后降低(　　) (3)DNA不溶于酒精溶液，而细胞中某些蛋白质易溶于酒精溶液中(　　) (4)蛋白质和DNA都能忍受80 ℃以上的高温(　　) (5)沸水浴条件下，DNA的结构仍可保持不变(　　) (6)在酒精溶液中析出DNA时，搅拌需轻缓地进行，以免严重断裂DNA分子(　　) (7)二苯胺试剂需要现配现用(　　) (8)将制备的含有DNA的滤液加入60～75 ℃恒温水浴箱中保温10～15 min，可以将蛋白质沉淀析出(　　) × × √ × × √ √ √ 2.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同来提取的，DNA的溶解度与图示曲线的对应点相符合的是 A.a点浓度最适合析出DNA B.b点浓度最适合析出DNA C.c点浓度最适合析出DNA D.d点浓度最适合析出DNA B 3.(2019·河北衡水中学校级月考)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的原理的叙述，正确的是 A.利用“所有蛋白质不能忍受60～80 ℃的高温，而DNA在80 ℃以上才会变性”的特性提纯DNA B.利用“DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，易析出”的特性提取DNA C.利用“DNA不溶于酒精，而细胞中某些蛋白质可溶于酒精”特 ... ...