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课件网) 第三章 基因的本质 第三节 DNA的复制 有人认为DNA复制就像复印材料一样，一张材料复印一次也可以得到两张一旧一新的材料。 复制时,DNA的双螺旋解开; 互补的碱基间氢键断裂; 分开的两条链作为模板,以碱基互补配对的原则合成新的一条链. 沃森、克里克作出假说——— DNA的复制方式为半保留复制 一、对DNA复制的推测 1、半保留复制：形成的分子一半是新的，一半是旧的； → 2、全保留复制：新复制出的分子直接形成，完全没有旧的部分； → 同位素标记技术 1、用实验证明DNA的复制方式，关键思路是什么？ 要区分亲代和子代DNA 2、DNA是肉眼看不见的，如何才能分辨DNA呢？ 二.DNA半保留复制的实验证据 思考： 1、我们这里用什么区分原来链和新链？ 颜色 2、真实DNA有没有颜色？有没有其他方法把他们区分？ 没有 同位素标记技术 3、放射性同位素有哪些记得吗？ 放射性同位素： 14C 、32P 、3H 、35S 二.DNA半保留复制的实验证据 思考： 4、怎么标记上放射性呢？ 比如我们可以把原链中的C标记上放射性，子链中没有 5、放射性同位素标记法能区分开吗？ 不能，这种方法只能检查到整体有还是没有放射性，不能区分每一条链有无放射性 有放射性 有放射性 二.DNA半保留复制的实验证据 思考： 6、除了放射性外，原链和新链还有什么不同？ 原链上的C都为14C,新链中的C都为12C，相对分子质量不同，一条重，一条轻。 7、既然我们不需要放射性，用哪种同位素更好？ 稳定同位素 有放射性 有放射性 14C 12C 14C 12C 14C 14C 12C 12C 稳定同位素： 15N 、18O 二.DNA半保留复制的实验证据 思考： 8、这些DNA密度有什么区别？ 9、有什么方法可以把他们区分开吗？ 密度梯度离心 15N 14N 15N 14N 14N 14N 15N 15N 密度最大 密度居中 密度居中 密度最小 用15N标记原来的DNA链，然后将它在14N环境中培养，让它复制，收集并提取DNA再进行密度梯度离心（离心技术），记录观察。 二、DNA半保留复制的实验证据 同位素标记技术 15N 15N 15N 14N 15N 14N 14N 15N 14N 14N 14N 14N 15N 14N （15N密度比14N大） 亲代 第一代 第二代 14N/14N—DNA（轻带） 14N/15N—DNA（中带） 15N/15N—DNA（重带） 15N 15N 14N 15N 15N 14N 14N 14N 比较密度高低： < < = 演绎推理 假设DNA的复制是半保留复制 提出DNA离心 15N/15N 让大肠杆菌在15N的培养液中生长若干代 将细菌转移到含14N的培养液中长出第一代子代 提出DNA离心 15N/14N 将细菌于14N的培养液中长出第二代子代 提出DNA离心 14N/14N 15N/14N 演绎推理 15N 15N 假设DNA的复制是全保留复制 15N 15N 14N 14N 15N 15N 14N 14N 14N 14N 14N 14N 15N/15N 14N/14N 15N/15N 14N/14N 15N/15N 亲代 第一代 第二代 实验验证 实验结论： DNA分子的复制方式是半保留复制 作出假说 演绎推理 实验验证 假说-演绎法 小结 （1）DNA的复制是半保留复制 （2）如何设计实验及子代DNA可能的情况 （3）通过实验进行验证 DNA的复制方式为半保留复制 得出结论 三、DNA分子复制的过程 思考： 1 概念 2 时间、场所 3 条件 4 过程 5 特点、原则 6 准确复制的原因与意义 有丝分裂间期 2、时间: 3、场所： 1、概念： 以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。 (体细胞) (生殖细胞) 减数第一次分裂前的间期 真核生物：细胞核（主要）、叶绿体、线粒体 原核生物：细胞质(拟核和质粒) 亲代DNA分子的两条母链 细胞中游离的4种脱氧核苷酸 ATP 解旋酶，DNA聚合酶等 能量： 酶： 模板： 原料： 4、DNA分子复制时需何条件？ （作用于氢键） （作用于磷酸二酯键） 解旋酶催化，能量 解旋： 模板 （在DNA聚合酶的催化下，利用游离的脱氧核苷酸进行） 复制: 以母链为模板进行碱基配对 母链（旧 ... ...
