课件42张PPT。专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养课题2 月季的花药培养课题1 菊花的组织培养课题1 学习目标、重难点学习目标： 1、掌握植物组织培养的原理 2、学会菊花或其他植物的组织培养 重 难 点： 植物组织培养过程中使用的 无菌技术 菊花的组织培养 脱分化： 由 的植物组织或细胞 产生 的过程。 2. 愈伤组织： 细胞排列 而无规则，是一种 的呈 的 。 3. 再分化： 脱分化产生的 继续培养， 重新分化出 或 等器官的过程。 4. 植物组织培养的理论基础： 植物细胞的 。高度分化 愈伤组织 疏松高度液泡化无定形状态 薄壁细胞愈伤组织 根 芽 全能性植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素植物细胞培养不需要光需要光 在无菌和人工控制条件下， 将离体的植物器官、组织、细胞， 培养在人工配制的培养基上， 给予适宜的培养条件， 诱导其产生愈伤组织、丛芽， 最终形成完整的植株。基础知识（一）植物组织培养的基本过程由高度分化的植物组织或 细胞产生愈伤组织的过程脱分化去分化细胞排列疏松而无规则， 是一种高度液泡化的呈 无定形状态的薄壁细胞。愈伤组织我就是 愈伤组织哦！再分化 愈伤组织 （脱分化）（二、）影响植物组织培养的因素材料的种类、年龄及保存时间长短等 营养 植物激素 PH、温度、光照等条件（1）植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难1、不同的组织，培养的难易程度差别很大菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝2、材料的年龄、保存时间的长短（2）MS培养基主要成分包括：A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、 I、Co等C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、 蔗糖等 D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向（3）植物激素的影响生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）细胞分裂素类：激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT）赤霉素类：赤霉酸（GA3）（4）pH、温度、光照pH控制在5.8左右 温度控制在18－22℃ 每日用日光灯照射12h一、制备MS固体培养基 1、配制母液 2、配制培养基 二、外植体消毒 四、培养 五、移栽 六、栽培实验操作3、灭菌三、接种（一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备1、配制各种母液①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量2、配制培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml① 配制培养液② 调PH③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右② 酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 ③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液（三）接种污染的主要来源是 ... ...
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