课件编号17368945

3.2基因工程的基本操作程序(第2课时)课件(共23张PPT)2022—2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

日期:2024-06-16 科目:生物 类型:高中课件 查看:96次 大小:4465760Byte 来源:二一课件通
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(课件网) 基因工程的基本操作程序(第二课时) 年 级:高 二 学 科:生物(人教版) 主讲人: 学 校: 微课课件 微课课件 温故知新 苏云金杆菌 提取 Bt抗虫蛋白基因 与载体拼接 重组DNA分子 普通棉花 (无抗虫特性) 棉花细胞 (含Bt基因) 转基因棉花 (有抗虫特性) 导入 1.目的基因的筛选与获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 微课课件 二、基因表达载体的构建 获取了足够量的Bt基因后,下一步就是要让基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代; 同时,使Bt基因能够表达和发挥作用。 构建基因表达载体(核心工作) 基因表达载体由哪些部分组成 微课课件 位置: 功能: RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA,最终获得蛋白质。 基因的首端(一段有特殊结构的DNA片段) 人们所需要的基因 位置: 功能: 基因的尾端(一段特殊的DNA片断) 终止转录 用来鉴别或筛选含有重组DNA分子的细胞 基因表达载体的组成 二、基因表达载体的构建 微课课件 二、基因表达载体的构建 基因表达载体构建模式图 DNA分子 (含目的基因) 或能产生相同末端的限制酶切割 带有黏性末端或平末端的切口 带有相同黏性末端或平末端的目的基因片段 DNA连接酶 重组DNA分子 (重组质粒) 同一种限制酶切割 载体 (质粒) 微课课件 任务一 请结合下图,回答问题: 问题: 构建基因表达载体时,能否用SmaⅠ限制酶切割质粒?为什么? 微课课件 任务一 请结合下图,回答问题: 问题: 构建基因表达载体时,能否用SmaⅠ限制酶切割质粒?为什么? 不能 因为SmaⅠ切割会破坏质粒的抗生素抗性基因。 质粒上的抗性基因是标记基因,便于重组DNA分子的筛选,若被破坏,无法进一步筛选。 微课课件 任务二 问题:与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点是什么? 请结合下图,回答问题: 微课课件 任务二 问题:与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点是什么? ①可以防止质粒、目的基因的自身环化连接; ③还可以防止目的基因与载体的反向连接。 请结合下图,回答问题: ②可以防止质粒、目的基因的两两自身连接; 微课课件 使用一种限制酶进行切割,共有几种连接情况? 应用过程中往往选择2种不同的限制酶同时对目的基因和质粒切割,减少自连情况出现 载体 目的基因 自连 片段间的连接 目的基因自连 质粒自连 目的基因与质粒连接 目的基因与目的基因连接 质粒与质粒连接 正向连接 反向连接 1 1’ 2 2’ 1 2 2’ 1’ 2 1’ 1 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 任务三 [阅读教材]阅读P80-82页内容及P81资料卡,找出并总结将目的基因导入受体细胞的具体操作方法。 受体细胞 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 1、花粉管通道法 ②在植物授粉后一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴在花柱切面,使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。 ①用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中; 花粉管通道法导入外源DNA 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 2、农杆菌转化法 农杆菌转化法步骤: 表现出新性状的植株 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 3、显微注射法-动物细胞 目的基因的表达载体提纯 受精卵 显微注射 受精卵发育 获得具有新性状的动物 显微注射技术 ①个体大,易操作。 ②受精卵全能性高,易培养成完整个体。 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 4、Ca2+转化法-原核细胞 (1)使用Ca2+处理: 可使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 (2)过程 繁殖快,单 ... ...

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