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课件网) 第3章 基因工程 指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。 【归纳定义】工程别名： 操作对象： 操作水平： 工程实质： 什么是基因工程？ 重组DNA技术 基因 DNA分子水平 基因重组 第1节 重组DNA技术的基本工具 从社会中来 转基因番木瓜（左）与非转基因番木瓜（右） 番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。 DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。 那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”？ 这些“分子工具”各具有什么特征呢？ 三种“分子工具” “分子手术刀” “分子缝合针” “分子运输车” 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ G 限制酶 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 磷酸二酯键 T G C C G T A A 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 5' 3' 5' 3' 仔细观察以下四种限制酶识别的特定序列有何特点？ EcoRⅠ ……G-A-A-T-T-C…… ……C-T-T-A-A-G…… HindⅢ ……A-A-G-C-T-T…… ……T-T-C-G-A-A…… BamHⅠ ……G-G-A-T-C-C…… ……C-C-T-A-G-G…… TaqⅠ ………T-C-G-A……… ………A-G-C-T……… 限制酶所识别的序列的特点是：呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ，称为回文序列。 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 黏性末端 黏性末端 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 EcoRI 限制酶的切割： 只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 来源： 种类： 主要来自原核生物 特点： 数千种 能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。 （限制酶不是一种酶，而是一类酶） 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 根据你所掌握的知识你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么？ 主要起到切割外源DNA使之失效，从而达到保护自身的目的。 旁栏思考 中轴线 SmaI 限制酶的作用： 只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。 在C和G之间切开 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 平末端 平末端 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 结果： 产生黏性末端或平末端 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 （1）该DNA片段上EcoRI的识别序列在哪儿？ （2）请用剪刀模拟EcoRI的识别序列和切割位点将目的基因“切割”下来。 实践活动一、用剪刀模拟EcoRI剪切目的基因(Bt基因)操作 5’...TAG 3’...ATCTTAA AATTCCA...3’ GGT...5’ AATTC ...... B t ...... G G .....基因......CTTAA 黏性 末端 目的基因 黏性 末端 要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？ 如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割，会怎样？ 要切2个切口，产生4个黏性(平)末端。 会产生相同的黏性(平)末端 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 思考 【反馈练习】 1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（ ） A．GAATTC B．GGGGCCCC CTTAAG CCCCGGGG C．CTGCAG D．CTAAATC GACGTC GATTTAG D 一、限制性内切核酸酶 ———分子手术刀 2 ... ...
