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课件网) 色谱分析法 一.色谱法的发现 俄国植物学家茨维特在1901年用于分离植物叶绿素的装置 §1. 概述 碳酸钙 石油醚 植物色素 色谱分析———基于物质的物理性质进行分离和分析的方法。 色谱法是一种分离方法，其特点为存在两相 流动相———携带试样混合物流过固定相的流体（气体或液体) 固定相———固定不动的一相 将色谱法用于分析中，称为色谱分析 碳酸钙 石油醚 §1. 概述 样品混合物中各组分性质和结构的差异，与固定相发生作用的大小也有差异 二、色谱法分离基本原理 §1. 概述 碳酸钙 石油醚 流动相+样品混合物 固定相 产生相互的作用 不同组分在固定相中的滞留时间不同，按先后次序从固定相中流出实现分离。 三. 色谱法的分类 §1. 概述 按流动相状态的不同，可分为: 气相色谱法 (GC) 液相色谱法 (LC) 超临界流体色谱 (SFC) 以气体为流动相的色谱法，简称GC（Gas Chromatography） 应用范围：用于分离分析易汽化（在-190~ 500℃范围内有0.2~10mmHg的蒸气压）、热稳定、不易分解、不易反应的样品，特别适合用于同系物、同分异构体的分离。 气固色谱(GSC) 气液色谱(GLC) 按固定相状态分为 §1. 概述 1. 气相色谱法 2. 液相色谱法 以液体为流动相的色谱法，简称LC（Liquid Chromatography）。 应用范围：用于分离分析高沸点、热不稳定、离子型的样品。 §1. 概述 分配色谱法 吸附色谱法 离子色谱法 空间排阻色谱法 分类 四. 色谱分析仪器基本流程 气相色谱仪 §1. 概述 液相色谱仪 §1. 概述 流动相携带进样装置引入的混合试样进入色谱柱 混合试样在色谱柱中进行分离 各组分依次进入检测器检测 检测响应信号导入计算机 得到色谱图 根据色谱图参数进行定性定量分析 流动相 进样 装置 色谱柱 检测器 数据记录与处理 样品 色谱分析仪器基本流程 §1. 概述 五. 色谱法的特点 : 优点： 分离效能高 选择性好 灵敏度高 分析速度快 应用广泛 不足之处： 定性能力不强 分离，分析双重功能 §1. 概述 关于色谱峰 关于保留值 关于峰宽度 关于色谱曲线的意义 一、色谱相关术语 §2、色谱法基本理论 1. 关于色谱峰的术语 色谱峰 峰高 基线 峰宽 半峰宽 峰面积 标准偏差 §2、色谱法基本理论 (1) 色谱流出曲线 组分浓度（或电信号）随时间的变化曲线 (2) 基线 只有流动相经过检测器时，所产生的信号，反映实验条件的稳定情况。稳定时为直线。 E E t 正态分布 定性、定量 分离效果显示 基线 §2、色谱法基本理论 2. 关于保留值的术语 （1） 用时间表示的保留值 tR保留时间：进样 柱后出现Cmax值时所需时间 tM死时间: 不与固定相作用的组分的保留时间 t R 调整保留时间: t R =tR - tM 进样 空气峰 tR tR’ tM （2）用体积表示的保留值 VR保留体积 : VR = tR×qv,0 V ’R调整保留体积: V’R=VR-VM VM死体积： VM = tM×qv,0 进样 空气峰 tR tR’ tM qv,0为柱出口处的载气流速, mL·min-1 （3）相对保留值 r21 r21 同种固定液对难分离物质对的选择性度量 在气相色谱中， r21的大小仅与固定相种类和柱温有关。在液相色谱中， r21与固定相、流动相及柱温有关。 r21是色谱定性的重要参数，实验室之间可通用。 r21 越大，两组分分离越容易 §2、色谱法基本理论 3. 关于色谱峰区域宽度的术语 （1）标准偏差（σ）：0.607h处峰宽的一半 反映分离条件的好坏，衡量柱效率 （2）半峰宽（Wh/2）：峰高1/2处的峰宽 tM h 0.607h σ =1/2CD C D 1/2h Wh/2 = AB A B W=4σ Wh/2= Wb §2、色谱法基本理论 （3）峰底宽度（W）：自色谱峰两侧的转折点所作 切线在基线上的截距 4. 色谱曲线的意义 色谱峰数=样品中单组分的最少个数； 色谱保留值———定性依据； 色谱峰高或面积———定量依据； ... ...
