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课件网) 2.1 植物细胞工程 第二课时 02 天竺葵的组织培养 (1)实验目的 ①学会配制植物组织培养的培养基(如MS培养基)，学会外植体的制备、_____、消毒、灭菌等多项技术。 ②掌握 在愈伤组织再分化等过程中的作用，学会合理使用植物激素。 ③尝试进行植物组织培养，关注植物组织培养技术在生产中的应用。 接种 植物激素 走进实验室：天竺葵的组织培养 (2)实验原理 ①植物体的每个体细胞都携带了来自受精卵的完整的_____。当其处于_____状态时，经过适当处理后，在适宜的培养基上，经过脱分化、再分化，可发育成完整的植株。 ②组织培养得到的试管苗是非常幼嫩的植株，其表面蜡质和角质层等保护组织 ，气孔 ，有叶绿体但光合作用 。这样的试管苗一般要经过 ，以逐渐适应自然环境下的生长条件。 (3)实验器材和试剂(见课本P49) 基因组 离体 不发达 数目少 能力差 炼苗 走进实验室：天竺葵的组织培养 培养基自然冷却后，置于30℃培养室中观察3 d，以检查是否_____ 倒入时不要让培养基粘到_____ 取 混合均匀 取蔗糖、琼脂，并加蒸馏水 调pH 混合 加入植物激素 加入蒸馏水定容至lL (4)实验步骤 母液 瓶口或瓶壁上 彻底灭菌 走进实验室：天竺葵的组织培养 培养基的 配制与灭菌 配制 MS培养基 加热搅拌至半透明状 分装 与灭菌 倒入培养基的量一般为锥形瓶容量___ 用 灭菌 高压蒸汽灭菌锅 幼嫩 70% 氯化汞 叶脉 外植体 走进实验室：天竺葵的组织培养 消毒： 酒精 30s 无菌水 2-3次 次氯酸钠溶液 30min 无菌水洗 2-3次 消毒与无菌水冲洗 超净工作台或接种箱 切割 6~8 灼烧 交叉污染 生芽 生根 蛭石或珍 珠岩 1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性，那植物细胞具有全能性的原因是什么？ 提示 植物体的每个体细胞都携带了来自受精卵的完整的基因组，即植物细胞内含有生物生长发育所需的全套遗传物质。 2.来自同一植物体的分化程度不同的体细胞所含遗传信息是否相同？全能性大小是否相同？ 提示 遗传信息相同；全能性大小一般不相同，分化程度低的细胞全能性大于分化程度高的细胞。 核心探讨 3.以下是植物组织培养的过程，试回答相关问题： 提示 脱分化、再分化。 (1)①②分别是什么过程？ 核心探讨 提示 避免杂菌在培养基上迅速生长消耗营养，且有些杂菌会危害培养物的生长。 (2)在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？ 核心探讨 提示 诱导愈伤组织、诱导生芽和诱导生根的培养基不同，它们之间最大的差别是生长素和细胞分裂素的相对浓度的不同。 (3)在植物组织培养过程中，需要两次“转接”，一是将愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上，二是长出芽后再转接到诱导生根的培养基上，请问“转接”的原因是什么？ 核心探讨 (1)脱分化和再分化是植物组织培养的重要过程( ) (2)植物体的任何细胞都具有全能性，也都能表现出全能性( ) (3)诱导生芽的培养基和诱导生根的培养基完全一样( ) (4)脱分化过程一般不需要光照，再分化过程需要光照( ) (5)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。( ) (6)在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般都发生改变。( ) (7)在植物组织培养时，对外植体要进行灭菌处理( ) 自查自纠 √ × × √ × × × 1.体现细胞全能性的条件 材料 离体的植物器官、组织、细胞或原生质体 培养基 种类齐全、比例合适的营养物质及一定比例的植物激素 外界条件 ①无菌操作； ②光照：诱导愈伤组织时一般不需要光照，再分化时需要光照 核心归纳 2.生长素和细胞分裂素用量的比例对植物细胞发育方向的影响 生长素用量与细胞分裂素用量的比值 结果 比值高 有利于根的分化，抑制芽的形成 ... ...
