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课件网) 第一章 发酵工程 1.2.2 微生物的选择培养和计数 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌( Thermus aquaticus)，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应(PCR)。 这是因为水生栖热菌能在 70~80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 讨论 1.为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢？ 2.以上例子给我们在分离纯化微生物带来什么启示？ 实验室中微生物的筛选，也可以应用同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等) ，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 一、选择培养基 1.在被石油污染的土壤中可以筛选 微生物 2.在冰川冻土层可以筛选 微生物 3.漆酶属于木质降解酶类，分离产漆酶菌株的首选样品是 生活污水吗？ 分解石油 耐寒 不是 现学现用 选择培养基的概念 在微生物学中，将允许 生长， 同时 或 其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 特定种类的微生物 抑制 阻止 一、选择培养基 选择培养基的类型 类型 条件 分离得到的菌种 改变培养条件 70～80℃的高温 添加某种化学物质 加入青霉素 高浓度食盐 特殊碳、氮源 石油是唯一碳源 营养缺陷 不加碳源 不加氮源 水生栖热菌 酵母菌、霉菌等真菌 金黄色葡萄球菌 能消除石油污染的微生物 自养型微生物 固氮菌 一、选择培养基 怎样选择出抗氨苄（biàn）青霉素能力的细菌 培养基中加氨苄青霉素 具有抗氨苄青霉素能力的菌落 没有氨苄青霉素抗性的细菌 培养基+氨苄青霉素 培养基 没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰 一、选择培养基 思考 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。 基础培养基 选择培养基 一、选择培养基 选择培养基配方的设计 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源。 讨论： 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 思考·讨论 ？ 一、选择培养基 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基一 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二 2.从用途上来讲，培养基二属于 培养基，目的是为了获得 。 3.两种培养基共有的培养基成分有： 。 培养基一的碳源为 ，氮源为 ； 培养基二的碳源为 ，氮源为 。 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_____， 。该类培养基的主要用途为 。 固体 且比例为1.5%~2% 添加了凝固剂琼脂 分离、鉴定、计数 选择 能分解尿素的微生物 碳源、氮源、无机盐、水 牛肉膏 蛋白胨 葡萄糖 尿素 一、选择培养基 1.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入 A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物 D.高浓度食盐 2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是 A.CO2和N2 B.葡萄糖和N2 C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素 C D 练习 1g土壤中有多 ... ...
