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课件网) 第二章 细胞工程 第3节 胚胎工程 第2课时 胚胎工程技术及其应用 选必三 P60 授课教师：XXX 一头良种成年奶牛需3万--5万元，一头牛一胎只产一头牛犊，一生只生育4、5次。牛的自然繁殖的速度太慢，不能满足生产需要。牛的生育率虽然很低，但是一头母牛一生排出的卵细胞约200个左右，卵巢中卵母细胞数量是它的1000倍（20万）；公牛平均每次射精5ml,精子数50亿。 那如何实现良种牛快速繁殖呢 母牛其实是有很强的生殖潜能的，只是没有激发出来。 创设情境 1、“试管牛”是怎么回事？ 2、“试管牛”是应用哪些技术生产的？ 1982年世界首例“试管牛” 犊问世 创设情境 胚胎工程技术 （二） 胚胎移植 （三） 胚胎分割 （一） 体外受精 2.3.2 胚胎工程技术及其应用 试管动物: 是指通过人工操作使卵子在体外受精，经培养发育为早期胚胎后，再进行移植产生的个体。 个体 精子 卵子 受精卵 体外受精 早期胚胎 子宫 胚胎移植 早期胚胎发育 一、体外受精 1. 主要步骤： 体外受精技术主要包括_____、_____和_____。 卵母细胞的采集 受精 精子的获取 2. 基本原理： 人工模拟体内环境，包括营养、温度、pH等，使卵母细胞成熟，同时使精子获能，最终完成受精作用，并有计划地保存胚胎等。 3. 具体过程： （1）卵母细胞的采集和培养 法①：实验动物以及家畜猪、羊等：用_____处理，使其排出更多的卵子(超数排卵)，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。 促性腺激素 一、体外受精 3. 具体过程： （1）卵母细胞的采集和培养 法二：大家畜或大型动物等：从刚被屠宰的母畜的_____中采集卵母细胞或借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等直接从活体动物的_____中吸取,然后在体外进行人工培养成熟后（到_____期）,才能与获能精子受精。 卵巢 卵巢 MⅡ (中) B超活采仪 卵巢 M Ⅱ 期卵母细胞 成熟培养 卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱 方法 场所 是否培养 小型动物 大型动物 输卵管 卵巢 借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜 否，直接与获能的精子受精 是，需培养至 MⅡ(中)期 注射促性腺激素 一、体外受精 3. 具体过程： （1）卵母细胞的采集和培养 活体采集的牛卵母细胞 牛卵母细胞 牛卵巢 一、体外受精 3. 具体过程： (2)精子的采集和获能 精子在进行体外受精前需要精子获能处理。 体外精子获能的方法： ①培养法：放入人工配制的获能液中 ②化学诱导法：放在一定浓度的肝素或Ca2+载体的A23187溶液中 获能精子 精子离心处理 新鲜或解冻的精液 (精液可以冷冻保存) 获能处理 精子离心处理的目的？ 去除精清/浆中的抑制获能的物质。 一、体外受精 3. 具体过程： (3)体外受精 M Ⅱ(中)期 卵母细胞 体外受精 获能精子 适当的培养液 受精卵培养 将_____和_____置于适当的培养液(获能液或专用的受精溶液)中共同培养一段时间，来促使它们完成受精。 获能的精子 MⅡ(中)期卵母细胞 动物细胞培养：CO2培养箱 1.起保温作用，使温度控制在合适范围内。 2.作为缓冲液，维持PH值。 3.促进细胞分裂，促进呼吸作用。 作用： 4. 意义： 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，还可以为胚胎移植提供可用的胚胎。 精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。 【拓展】体外胚胎的早期培养 两盐：无机盐、有机盐 两酸：氨基酸、核苷酸 两素：维生素、激素 动物血清 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、 无机盐、微量元素、动物血清等 动物细胞培养液成分： 发育培养液成分： 获能液： 受精溶液： 发育培养液： ①用培养法使精子获能； ②在获能溶液中完成受精作用； 是专门的，精子、卵子完成受精的溶液； 是进行早期胚胎培养的； 【拓展 ... ...
