2.2动物细胞工程课件-(共47张PPT2份视频)人教版（2019）选择性必修3

(课件网) 2.2 动物细胞工程 动物细胞培养 1、动物细胞工程常用技术有哪些？基础技术是？ 2、动物细胞培养的定义、原理、培养对象、目的？ 3、动物细胞培养的条件？ 如何维持无菌、无毒环境？ 适宜的温度和pH分别是多少？渗透压的影响因素？ 适宜的气体环境包括？分别有什么作用？如何维持？ 4、动物细胞培养流程？体外培养动物细胞的种类？ 5、细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养的定义 6、动植物细胞培养的区别（原理、培养基种类、培养基特有成分、培养结果、细胞来源、特点）和相同之处 7、干细胞的定义、种类、应用 动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 定义： 细胞增殖 原理： 胚胎或幼龄动物细胞 培养对象： 获得细胞或细胞产物 目的： 一、动物细胞培养的条件 营养条件 其他条件 动物细胞培养 所需的基本条件 ＜ ＞ 糖类、氨基酸、无机盐、维生素…… 无菌、无毒的环境 适宜温度、pH、渗透压 适宜的气体环境 1、营 养 合成培养基：将细胞所需营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，加入血清等一些天然成分。 培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。 ▲培养皿 ▲培养瓶 2、无菌、无毒的环境 需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。 培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 ▲超净工作台 ▲酒精灯火焰附近 3、温度、pH和渗透压 温度：( 36.5±0.5 )℃ pH：7.2 ~ 7.4 4、气体环境 O2是细胞代谢所必需的 CO2的主要作用是维持培养液的pH。 通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 二. 动物细胞培养的过程 取动物组织 制成细胞悬液 转入培养液 原代培养 转入 CO2培养箱 机械法 酶解法： 胰蛋白酶和胶原蛋白酶 动物组织经过处理后的初次培养 转入 分瓶 传代培养 动物组织经过分瓶后的培养 CO2培养箱 贴壁细胞的收集： 悬浮培养细胞的收集： 离心法 胰蛋白酶等处理后离心 可以用胃蛋白酶在体外分散细胞吗？ 不可以；胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2 ~ 7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。 ▲ 贴壁生长示意图 ▲ 接触抑制示意图 培养瓶壁 1、能够悬浮在培养液中生长增殖的细胞 2、细胞贴壁的细胞 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖（接触抑制） 悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 体外培养的动物细胞可以分为哪两类？ 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养基类型 培养基特有成分 培养结果 细胞来源 特点 相同点 植物细胞的全能性 细胞增殖 液体培养基，合成培养基 固体培养基，天然培养基 植物激素、有机添加物（蔗糖） 血清、葡萄糖等 新个体或大量细胞或细胞产品 细胞或细胞产品 离体的植物器官、组织或细胞 胚胎或幼龄动物组织 1、分裂形成愈伤组织 2、分化形成胚状体 1、只分裂不分化 2、贴壁生长，接触抑制 无菌操作、适宜的环境、只进行有丝分裂 三. 干细胞培养及应用 动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞 1. 概念 2. 分布 早期胚胎 骨髓 脐带血 3. 分类： 发育阶段分： 胚胎干细胞（ES干细胞）和成体干细胞 成体干细胞： 位于成体组织或器官内的干细胞。如造血干细胞、神经干细胞、精原干细胞等。 红细胞 血小板 各类白细胞 造血干细胞 成体干细胞具有组织特异性，只能在特定的组织中分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。 分化潜 ... ...