江西省安义中学人教版选修一专题五第二节《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件（9张ppt）+教案共2份

课件9张PPT。■高中生物课件（人教课标版） 安义中学 课题2 DNA多聚酶链式反应扩增DNA片断( 1) 复制的时间：C、合成子代DNA细胞有丝分裂间期和减数第一次分裂间期（2）复制过程：A、解旋：B、合成子链：一、DNA分子复制的过程能量，酶（3）需要的条件：能量，解旋酶模板、原料、能量、酶（4）复制场所： （5）复制特点： （6）复制准确无误的原因：半保留复制；边解旋边复制DNA分子独特的双螺旋结构，为复制提供了精确的模板 碱基互补配对保证了复制能准确无误地进行主要在细胞核二、PCR原理二、PCR原理变性 实验操作步骤： （1）按配方将所需试剂摆放在实验桌上（准备） （2）用微量移液器按配方在微量离心管中依次加入各组分（移液） （3）盖严离心管口的盖子，用手指轻轻弹击管壁（混合） （4）将微量离心管放在离心机上（离心） （5）将离心管放入PCR仪上，设置好PCR仪的循环程序（反应） 专题5 DNA与蛋白质技术 课题5.2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 一、【课题目标】 （一）知识与技能 1、了解PCR技术的基本操作 2、理解PCR的原理 3、讨论PCR的应用 ???（二）过程与方法 　　在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件 （三）情感、态度与价值观 通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神 二、【课题重点】 PCR的原理和PCR的基本操作 三、【课题难点】 　PCR的原理 四、【教学方法】 启发式教学 五、【教学工具】 多媒体课件 六、【教学过程】 （一）引入新课 在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列，就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。 （二）进行新课 1．基础知识 PCR技术扩增DNA的过程，与细胞内DNA复制过程类似： 1．1细胞内DNA复制条件分析： 条件 组分 作用 模板 DNA的两条单链 提供复制的模板 原料 四种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 酶 解旋酶 DNA聚合酶 打开DNA双螺旋 催化合成DNA子链 能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能 引物 RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点 1．2细胞内DNA复制过程 （1）DNA的反向平行结构：（结合教材图5－6） 核苷酸分子的结构与方向性：（分子结构模式图） 由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链：（模式图，体现方向性）。 DNA双螺旋结构的反向平行结构： （2）DNA的复制过程: 解 旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。 引物结合：在DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。 DNA聚合酶结合： 子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。 后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链） 子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。 感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成，还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次，只有碱基配对无误后才能继续往下聚合，它不能从头合成。RNA聚合酶没有校对功能，因此RNA的合成不需要引物，而是从头合成的，它的错配可能性较大，在RNA引物完成功能后即被DNA聚合酶I删去，代之以高保真的DNA链。 ［思考］DNA分子能准确复制的原因有哪些？ DNA双螺旋结构提供模板；碱基互补配对；DNA聚合酶的复查功能。 ［思考］细胞内哪些物质是从头合成的？RNA合成、蛋白质合成。 1．3DNA分子复制的人工控制 解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。 恢 ... ...