1.2.2微生物的选择培养与计数的学案

1.2.2微生物的选择培养与计数的学案 【学习目标】 解释选择培养基筛选微生物的原理 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 运用无菌操作技术和微生物分离、培养的方法初步分离出目标菌 尝试解决生产、生活中与微生物选择培养、计数等有关的实际问题 【学习重难点】 教学重点 1.微生物纯培养的基本操作要求，微生物选择培养的原理。 2.酵母菌的纯培养。 3.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 教学难点 1.酵母菌的纯培养。 2.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【预习新知】 选择培养基 1、实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出 ，进而从这种菌中提取出 的 。 （PCR）是一种在 扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。 筛选原因：水生栖热菌能在 高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 2、实验室中微生物的筛选： 人为提供 目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时抑制或组织其他种类微生物生长的培养基，称为 。 微生物的选择培养 (1)稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌 土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行_____，然后再将菌液_____到制备好的_____，操作过程如下。 ①取样：铲取土样，将样品装入纸袋中。 ②稀释涂布平板法 A．系列稀释操作：将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 B．涂布平板操作 C．培养与观察 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板_____，放入30 ℃～37 ℃的恒温培养箱中培养1～2 d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的_____菌落。 微生物的数量测定 1、计数方法 (1)稀释涂布平板法：统计结果一般用 而不是用 来表示。 一般统计的菌落数比活菌的实际 ，因为当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是 。 计算公式：每毫升样品中的菌株数=(C÷V)xM,其中C代表某一稀释度下平板上生长的 ，V代表涂布平板时所用的 （mL)，M代表 。 (2)显微镜直接计数法：是一种常用的、 的测定微生物数量的方法。 统计的结果一般是 和 的总和。 计算公式： 每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数x400x103x 。 内容 直接计数法 间接计数法 主要用具 显微镜、细菌计数板或血细胞计数板 计数依据 培养基上 数 优点 计数方便、操作简单 计数的是 缺点 不能区分 操作较复杂且有一定误差 计算公式 每毫升原液含菌株数＝400×1000×每小格平均菌株数×稀释倍数 每毫升原液含菌株数＝平均菌落数/所用涂布液体积×稀释倍数 【易错提示】 稀释涂布平板法的注意事项 (1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 (2)涂布平板时 ①涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将蘸有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。 ③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体。 【深化探究】 【任务驱动一】　选择培养基 1．目的：从众多的微生物中分离所需要的微生物。 2．三种筛选方法的特点及举例 方法 特点 举例 利用微生物的营养特点进行选择培养 通过控制培养基的营养成分，使某种微生物能生长，其他微生物不能生长 利用只含有尿素一种氮源的培养基，可筛选出分解尿素的细菌 利用某种化学物质进行的选择培养 在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质对微生物产生的影响，抑制某些微生物，同时选择所需的微生物 加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 利用培养条件进行的 ... ...