第2节 微生物的培养技术及应用 【学习目标】 1.通过配制培养基,了解配制培养基的基本步骤,以及培养基中各类营养物质的配比。(科学探究) 2.通过对培养皿和培养基进行灭菌,了解消毒和灭菌的原理及方法。(科学思维) 3.通过酵母菌的纯培养,理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。(科学探究) 第1课时 微生物的基本培养技术 【自主预习】 一、培养基的配制 1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其 生长繁殖 的营养基质———培养基。 2.分类 培养基种类 划分标准 特点 用途 液体 培养基 物理性质 不加凝固剂 工业生产 固体培养基 加凝固剂,如 琼脂 微生物分离、鉴定等 3.营养成分 (1)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有 水、碳源、氮源和无机盐 等营养物质。 (2)培养基还需要满足微生物生长对pH、 特殊营养物质 以及O2的需求。 4.对培养基的特殊需求 (1)培养乳酸杆菌时,在培养基中添加 维生素 。 (2)培养霉菌时,将培养基调至 酸性 。 (3)培养细菌时,将培养基调至 中性或弱碱性 。 (4)培养厌氧微生物时,需要提供 无氧的条件 。 二、无菌技术 1.获得纯净的微生物培养物的关键是 防止杂菌污染 。 2.消毒与灭菌 (1)概念 ①消毒:使用较为 温和 的物理、化学或生物等方法杀死物体 表面 或内部 一部分 微生物。 ②灭菌:使用 强烈 的理化方法杀死物体内外 所有 的微生物,包括 芽孢和孢子 。 (2)类型与方法 连一连:将无菌技术类型、常用方法和适用对象用线连起来。 3.具体操作 (1)对操作的 空间 、操作者的衣着和手进行清洁和 消毒 。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 灭菌 。 (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在超净工作台上并在 酒精灯火焰 附近进行。 (4)实验操作时要避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 三、微生物的纯培养 1.培养物、纯培养物与纯培养的概念 项目 概念 培养物 接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体 纯培养物 由 单一个体 繁殖所获得的微生物群体 纯培养 获得纯培养物的过程 2.过程 配制培养基→ 灭菌 →倒平板→ 接种 →分离→培养。 3.酵母菌的纯培养 纯培养的原理 由 单一个体 繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得 纯培养物 的过程就是纯培养 纯培养方法 平板划线法 和稀释涂布平板法 纯培养过程 制备培养基 配制培养基 →灭菌→ 倒平板 接种和分 离酵母菌 用 平板划线 法在固体培养基表面接种酵母菌,经数次划线后培养,可以分离得到单菌落 培养酵母菌 待菌液被 培养基 吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板 倒置 ,放入28 ℃左右的恒温培养箱中培养 24~48 h 【合作探究】 任务1 配制培养基 活动1 制备牛肉膏蛋白胨培养基 不同微生物对营养物质的需求不同,配制的培养基可以用于培养、分离、鉴定、保存微生物。下表记录了牛肉膏蛋白胨培养基的配方。 组分 含量 牛肉膏 5.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 5.0 g 琼脂 15.0~20.0 g 蒸馏水 定容至1000 mL 1.该培养基中主要提供碳源和氮源的物质各是什么 提示 主要提供碳源的是牛肉膏,主要提供氮源的是蛋白胨。 2.该培养基是固体培养基,还是液体培养基 提示 固体培养基,因为该培养基中加入了凝固剂(琼脂)。 3.若需要培养其他微生物,也可用牛肉膏蛋白胨培养基吗 提示 不同种类的微生物代谢特点不同,对培养基中营养物质的需求也不同,因此培养不同的微生物,需要按其对营养物质的需求特点配制培养基。如: (1)自养型微生物所需的营养物质主要是无机盐, 碳源可来自大气中的CO2,如光合细菌、硝化细菌;氮源可由含氮无机盐提供,如硝酸盐。 (2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,即碳源和氮源一般都由 ... ...
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