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课件编号19977044
3.1.3DNA的粗提取与鉴定课件(共28张PPT)-人教版(2019)选择性必修3
日期:2024-05-10
科目:生物
类型:高中课件
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来源:二一课件通
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3.1.3DNA
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) 探究·实践 DNA的粗提取与鉴定 历史上第一管DNA粗提取物 Friedrich Miescher(1844-1895) 历史上最早注意到DNA这个东西的人是当时年仅24岁的瑞士医生Friedrich Miescher。他利用大量刚换下的外科绷带来分离白细胞的化学组分。当他用各种溶剂一点点冲洗,分离脓液中的各种组分时,他发现析出的一个东西有点不太一样:它在弱酸性溶液里会沉淀,提高碱性后又会重新溶解。这就是历史上第一管DNA粗提取物。 (图片来自百度) 实验目的:利用不同生物材料进行DNA的粗提取与鉴定 猕猴桃 2n=58 洋葱 2n=16 葱白 2n=16 一、分析本实验涉及的DNA物理性质和化学性质 具体表现 物理性质 化学性质 DNA不溶于酒精,但能溶于2 mol/L的NaCl溶液。 在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。 实验原理 1.DNA存在于真核细胞的什么部位? 2.如何使DNA从细胞内到达细胞外? 3.如何将DNA与不溶性杂质分离? 4.如何将DNA与可溶性蛋白等杂质分离? 5.鉴定DNA的原理是什么? 二、明确DNA粗提取与鉴定的原理 实验原理 1.DNA存在于真核细胞的什么部位? 细胞核(主要) 线粒体(少量) 叶绿体(少量) (图片来自人教版必修1) 2.如何使DNA从细胞内到达细胞外? (图片来自人教版必修1) 机械外力破碎———研磨 SDS 研磨液 EDTA Tris-HCl缓冲液 抑制DNA酶活性 瓦解细胞膜 维持pH稳定 3.如何将DNA与不溶性杂质分离? 过滤 4.如何将DNA与可溶性蛋白质等杂质分离? DNA 可溶性蛋白质等 DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精 DNA沉淀析出 离子 5.二苯胺鉴定DNA的原理 彻底水解 4种含氮碱基 脱氧核糖 磷酸 H+ -H2O -羟基-γ-酮基戊醛 蓝色物质 DNA 1.利用DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精这一原理初步分离DNA和蛋白质。 2.利用在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色这一原理鉴定DNA。 实验原理 实验材料:洋葱、葱白、猕猴桃、研磨液、体积分数为95%的酒精、二苯胺试剂、蒸馏水 实验器具:烧杯、量筒、移液枪、枪头、塑料杯、塑料管、研磨过滤器、恒温水浴锅、10mL离心管等 实验材料和器具 选取洋葱、葱白、猕猴桃三种常见蔬菜水果,借助研磨液和研磨过滤器破碎细胞,释放DNA,再利用预冷的酒精溶液(体积分数95%)将DNA以白色丝状物的形式析出,最后利用蒸馏水溶解DNA并加入二苯胺试剂进行鉴定,比较不同实验材料进行DNA粗提取的效果是否存在差异。 实验设计思路 实验过程 实验结论:不同实验材料进行DNA粗提取效果存在差异,其中葱白提取效果相较于洋葱和猕猴桃更好。 实验结果 葱白组 对照 洋葱组 猕猴桃组 要加入等量的生物材料,并且研磨材料时必须充分。 实验前要将95%的酒精溶液进行预冷处理。 尽可能干燥白色丝状物再进行溶解,防止其上的酒精影响后续的溶解与鉴定。 加入二苯胺后进行沸水浴,沸水浴时间要充足。 待DNA-二苯胺混合液冷却后再观察其颜色变化。 注意事项 研磨过滤器 创新装置优势: 1.研磨过滤一步到位,简单方便 2.操作过程中材料不易损失浪费 实验创新点 一、装置改进,化繁为简,效果明显 创新装置优势: 3.塑料制品不带电荷, 不会吸附DNA分子 一、装置改进,化繁为简,效果明显 实验创新点 创新装置优势: 3.塑料制品不带电荷,不会 吸附DNA分子 一、装置改进,化繁为简,效果明显 实验创新点 实验创新点 二、材料改进,突破传统材料瓶颈 洋葱 葱白 猕猴桃 创新材料优势: 1.容易研磨 2.实验效果明显 创新材料优势: 1.容易研磨 2.实验效果明显 洋葱 葱白 猕猴桃 实验创新点 二、材料改进,突破传统材料瓶颈 创新试剂优势: 1.无需配制,简单方便 2.实验效果明显 葱白+NaCl 葱白 +蒸馏水 洋葱+NaCl 洋葱 +蒸馏水 猕猴桃+NaCl 猕猴桃 +蒸馏水 实验创新 ... ...
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