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课件网) 第2章 细胞工程 第3节 胚胎工程(2)--基本技术及应用 胚胎工程 早期胚胎培养 受精 胚胎移植 体外受精 胚胎分割 基本技术及应用 理论基础 学习目标 资料1： 1.引进一头良种成年奶牛需3万--5万元 2.一头牛一胎只产一头牛犊，一生只生育4、5次。 实际问题: 背景知识 牛的生育率虽然很低，但是一头母牛一生排出的卵细胞约200个左右，卵巢中卵母细胞数量是它的1000倍（20万）；公牛平均每次射精5ml,精子数50亿。 牛的自然繁殖的速度太慢，不能满足生产需要； 母牛其实是有很强的生殖潜能的，只是没有激发出来。 国产奶牛:年均产奶量3000公斤左右; 国际良种奶牛:年均产奶量10000公斤左右; 我国蒙古黄牛:均重300KG； 海福特肉用牛:2岁体重可达800KG。 资料2： 那如何实现良种牛快速繁殖呢 背景知识 1982年世界首例“试管牛” 犊问世 1、“试管牛”是怎么回事？ 2、“试管牛”是应用哪些技术生产的？ 资料3： 试管动物 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精(体外受精)，并通过培养发育为早期胚胎培养后，再经移植产生后代的技术。 个体 精子 卵子 受精卵 体外受精 早期胚胎 子宫 胚胎移植 早期胚胎发育 基本技术1:体外受精 卵母细胞的采集 培养 成熟卵母细胞 精子的采集 获能处理 获能的精子 受精 受精卵 1）卵母细胞的采集和培养 2）精子的采集和获能 3）受精 基本技术1:体外受精 1）卵母细胞的采集和培养 方法一：输卵管采卵(冲取卵子) 超数排卵:利用促性腺激素促使雌性动物排出更多的卵子，从输卵管中冲取卵子。 适合实验动物(兔、鼠)以及家畜猪、羊等。 方法二：屠宰动物的卵巢采卵 从已屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞。 适合大型动物或大家畜，如：牛、马等。 牛卵巢 牛卵巢取卵 方法三：活体采卵(卵巢中) 借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等仪器，直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞。 适合大型动物或大家畜，如：牛、马等。 获得的卵子可以直接与获能精子在体外受精吗？ 基本技术1:体外受精 1）卵母细胞的采集和培养 采集方法 适用范围 采集过程 培养 输卵管采卵 (冲取卵子) 卵巢采卵 屠宰动物 的卵巢采卵 活体采卵 实验动物以及家畜 大型动物 或大家畜 小鼠 兔 猪 羊 牛 马 利用促性腺激素促使雌性动物排出更多的卵子，从输卵管中冲取卵子。 从已屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞 借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等仪器，直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞。 可直接与获能的精子在体外受精。 采集后的卵母细胞都要在体外经过人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。 (不需要) (需要) 基本技术1:体外受精 2）精子的采集和获能 ①精子的采集方法(3种) 假阴道法 | 手握法 | 电刺激法 ②精子的获能 方法 操作过程 适用动物 培养法 将精子放入人工配制的获能液中使其获能 啮齿动物、家兔及猪等动物 化学 诱导法 将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能 牛、羊等家畜 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中共同培养一段时间。 精子获能前应离心处理： 精液由精子和精清两部分组成。精清中含有一种能抑制精子获能的物质，因此在一般情况下，精液中的精子无法获能。 精子获能前进行离心处理，目的是除去精清以利于精子获能。 基本技术1:体外受精 3）体外受精 哺乳动物体外受精过程示意图 项目 自然受精 人工授精 体外受精 不 同 点 过程不同 雌雄动物 交配完成 用人工的方法将公畜的精液注入母畜生殖道内，完成受精 人工获取精子、卵子，在体外培养液中完成受精过程 场所不同 雌性动物 输卵管中 雌性动物 输卵管中 体外培养液中 相同 ... ...
