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课件网) 第二课时 微生物的选择培养和计数 本节聚焦 怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理？ 如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物？ 测定微生物数量的常用方法有哪些？ 情境问题： 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，某研究小组想在土壤样品中分离得到能分解尿素的细菌，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现，该怎么办呢？ 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 思考：为什么要从热泉中筛选水生栖热菌呢？ 1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶被广泛应用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应（PCR） 美国黄石国家公园 耐高温的酶 耐高温生物体 寻找 寻找 高温环境（热泉、火山口） 影印法转移到含青霉素培养基中培养（实验组） 完全培养基培养长出所有菌落 下列菌落中怎样选择出具有抗青霉素能力的细菌 举例1 影印法转移到不含青霉素培养基中培养（对照组） 实验组没有青霉素抗性的细菌被淘汰 具有青霉素抗性的菌落 启示：在培养基中添加青霉素选择出具有抗青霉素能力的细菌 类比1：将土壤稀释液中能分解纤维素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 设计一种选择培养基,用纤维素作为唯一碳源,可以将分解纤维素的细菌分离出来 设计一种选择培养基,用石油作为唯一碳源,可以将分解石油的细菌分离出来 类比2：将土壤中能分解石油的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 总结：实验室中如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 一 选择培养基 选择培养基： 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，叫做选择培养基。 不加氮源 分离自养微生物 分离酵母菌和霉菌 (青霉素能杀死细菌、放线菌) 分离固氮微生物 加入青霉素 加高浓度食盐 分离金黄色葡萄球菌 石油是唯一碳源 分离能消除石油污染的微生物 不加碳源 针对训练1：写出能筛选出下列微生物的选择培养基： 思考-讨论 尿素的立体结构 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 讨论1：如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 讨论2：该培养基与普通（完全）培养基有哪些共同点和不同点？ 设计一种选择培养基，培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能利用尿素在该培养基上生长繁殖，而其他微生物由于缺乏氮源而受抑制。 细菌利用尿素的原因： 能合成脲酶。 CO(NH2)2 + H2O 2NH3 + CO2 脲酶 一 选择培养基 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基一（普通） KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二（筛选能分解尿素的细菌） 2.从用途上来讲，培养基二属于 培养基，目的是为了获得 。 1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是_____。 固体 添加了凝固剂琼脂 选择 能分解尿素的微生物 4.是否能根据选择培养基和完全培养基上的菌落数目来证明选择培养基具有筛选作用？ 能 完全培养基的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数 3.两种培养基共有的培养基成分有： 。 培养基一的碳源为 ，氮源为 ； 培养基二的碳源为 ，氮源为 。 牛肉膏、蛋白胨 牛肉膏、蛋白胨 葡萄糖 尿素 水 碳源 氮源 无机盐 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g ... ...
