1.2.1微生物的基本培养技术学案(含答案）

1.2.1微生物的基本培养技术学案 【预习新知】 （一）培养基的配制 1．培养基的概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其生长繁殖的 。 2．作用：用以 、 、 、保存微生物或积累其 。 3．培养基种类 标准 培养基种类 培养基特点 作用 物理性质 培养基 加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定 培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 功能 培养基 根据某种微生物的特殊营养要求配制 选择分离 培养基 加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂 鉴定 来源 培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 培养基 用已知的化学物质配制 分类鉴定 (1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂， (“能”、“不能”)为微生物生长提供能量和碳源。 (2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前 (“能”、“不能”)利用人工培养基来培养。 4．培养基的营养组成 (1)主要营养物质：水、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐。 (2)某种常见的细菌培养基———牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10 g 和维生素等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1 000 mL 水 (3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如： ①在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加 ； ②在培养霉菌时，一般需要将培养基pH调至 性； ③在培养细菌时，一般需要将培养基pH调至 性或 性； ④在培养厌氧微生物时，需要提供 的条件。 （二）无菌技术 1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止_____。 2．消毒和灭菌 项目 消毒 灭菌 概念 使用较为_____的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部_____微生物 使用_____的理化方法杀死物体内外_____的微生物，包括_____ 常用 方法 _____消毒法、巴氏消毒法、_____消毒法、紫外线消毒法 _____灭菌、干热灭菌、_____灭菌 适用 对象 操作的空间、操作者的衣着和双手等 接种用具(接种环、接种针)、玻璃器皿、培养基等 3.具体操作 (1)对实验操作的_____、操作者的衣着和手进行清洁和_____。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行_____。 4．注意事项 (1)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_____接触。 (2)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_____上并在_____附近进行。 （三）微生物的纯培养 1．平板划线法 平板划线操作及培养结果：接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。平板划线示意图(A)及培养后菌落分布示意图(B)如下图所示。 2．稀释涂布平板法 (1)主要操作环节：系列稀释和涂布平板。 (2)系列稀释和涂布平板后培养结果如图所示： 3．平板划线法与稀释涂布平板法的注意事项 (1)平板划线法： ①接种环的灼烧： a．第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物。 b．每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端。 c．划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者。 ②灼烧接种之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种。 ③划线时最后一区域不要与第一区域相连。 ④划线用力要大小适当，防止用力过大划破培养基。 (2)稀释涂布平板法： ①稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 ②涂布平板时： a．涂布器浸在体积分数为70%的酒精中，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。 b．不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。 c．酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不接触任何物体。 4．两种纯化细菌方法的比较 项目 优点 ... ...