1.2微生物的培养技术及应用（第二课时）课件(共24张PPT)人教版（2019）选择性必修3

(课件网) 平板划线法 单个细胞 微生物群 单个菌落 连续划线 分散 生长繁殖 分区划线法 连续划线法 选择性必修三 第 1 章 第 2节 微生物的培养技术 及应用（二） 1 mL 9 mL 无菌水 90mL无菌水 10g土样 稀释涂布平板法 单个细胞 微生物群 单个菌落 稀释分散 生长繁殖 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 1×10 （1）梯度稀释 移液枪 （2）涂布平板 取0.1mL菌液 滴加到培养基表面 用涂布器将菌液 均匀地涂布在培养基表面 涂布器 将涂布器浸在 盛有酒精的烧杯中 将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布 涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 灼烧灭菌 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30-37℃的恒温培养箱中，培养1-2d。 恒温培养箱 平板划线法 稀释涂布平板法 从社会中来 稀释涂布平板法 呈现的杂菌群 选择培养基 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。 选择培养基 将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 真菌 固氮微生物 ④石油作为唯一碳源的培养基： 分解石油的微生物 ③不加含碳有机物的培养基： ②不加氮源的培养基： ①加入青霉素(能杀死细菌、放线菌)的培养基能： 自养型微生物 分解尿素的细菌 ？ ⑤尿素作为唯一氮源的培养基： ④含高浓度食盐的培养基： 金黄色葡萄球菌 1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术 PCR仪 耐高温的DNA聚合酶 那么，自然界中什么环境中存在这种酶？ 美国黄石国家公园 筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术 PCR仪 耐高温的DNA聚合酶 那么，如何从众多的微生物中筛选出耐热的水生栖热菌？ 70-80℃高温选择培养基 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找！ 温泉 冰川 油田 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表3~8cm的土壤层。铲去表层土3cm左右，取样，将样品装入事先准备好的信封中。 取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手。 注 意 土壤取样 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 选择培养基 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 当样品中的稀释足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 一般选择菌落数为30~300的平板进行计数 至少3个平板重复计数，取平均值 菌落数往往少于活菌实际数，统计结果用菌落数 以尿素作为唯一氮源 稀释涂布平板法 分析：两种方法培养到的菌落，哪种才可以用于计数？ 稀释涂布平板法接种培养结果 平板划线法接种培养结果 不能计数 可以计数 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 例：甲同学做此实验在稀释倍数105获得3个平板，菌落数分别是80、90、100，涂布平板时均使用0.1ml菌液，试计算每克土壤中可以分离尿素的细菌数目？ （80+90+100）/3 0.1 × 105 =9 ×107个 方法一：稀释涂布平板法 ———间接计数法 0.1mL菌液 保证获得菌落数在30～300之间 血细胞计数板： 细菌计数板： 常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。 对细菌 ... ...