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课件网) 微生物的选择培养和计数 WEISHENGWUDEXUANZEPEIYANGHEJISHU 几种纤维素分解菌在刚果红 培养基上形成的透明圈 第2节 微生物的培养技术及应用 02 H N C NH 教学目标 1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求， 进行酵母菌的纯培养。 2.阐明微生物选择培养的原理。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要 的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合的菌群中 不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很 难实现。该怎么办呢 本节聚焦 1.怎样运用生物与环境相适应的观点来解释选择培养 的原理 2.如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微 生物 3.测定微生物数量的常用方法有哪些 1973年，科学家从美国黄石国家公园的热 泉中筛选出水生栖热菌(Thermus aquaticus), 进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。 这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的 聚合酶链式反应(PCR)。 讨论 1.为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢 这是因为水生栖热菌能在70~80 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微 生物在此条件下不能生存。 2.以上例子给我们在分离纯化微生物带来什么启示 实验室中微生物的筛选，也可以应用同样的原理，即人为提供有利于 目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生 物的生长。 类型 条件 分离得到的菌种 (1)改变培养条件 70～80℃的高温 水生栖热菌 (2)添加某种化学物质 加入青霉素 酵母菌、霉菌等真菌 高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 (3)营养缺陷 不加碳源 自养型微生物 不加氮源 固氮菌 (一)选择培养基 1. 定义 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或 阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2.类型 (一)选择培养基 怎样选择出抗氨苄 (biàn) 青霉素能力的细菌 培养基中加氨苄青霉素 没有氨苄青霉素抗 性的细菌被淘汰 没有氨苄 青霉素抗 性的细菌 具有氨苄 青霉素抗 性的菌落 培养基 应有菌落 O 尿素[CO(NH ) ] 含氮量高，化学性质稳定，是现代 农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤 中的某些细菌分解成NH , 再被转化为NO 、NH +等被植物 吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成 脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH ,NH 可以作为细菌生长 的氮源论： 1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解 尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计 2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点 设计一种选择培养基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他 营养成分基本相同。 选择培养基配方的设计 ⑨ 思考 ·讨论 1.从物理性质来讲，两者属于固体培 养基， 判断依据是添加了凝固剂琼脂，且比例为1.5%~2% 该类培养基的主要用途为 分离、鉴定、计数 ; 2. 从用途上来讲，培养基二属于 选择 培养基， 目的是为了获得 能分解尿素的微生物 ; 3. 两种培养基共有的培养基成分有：碳源、氮源、无机盐、水 ; 培养基一的碳源为 牛肉膏， 氮源为蛋白胨 ; 培养基二的碳源为 葡萄糖，氮源为 尿 素 0 培养基二 KH PO 1.4g NaH PO 2.1g MgSO ·7H 0 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH ) 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基一 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 由以上分析，可以知道如何分离土壤中能分解尿素 的细菌，然而，能否估算出1 g 土壤中的有多少分解 尿素的细菌呢 要如何解决 不能，还需要对土壤进行适当的处理以及科学的测 定微生物数量的方法。由于土壤中细 ... ...
