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课件网) 第三章 第1节 《重组DNA技术的基本工具》 高二生物 选择性必修3 人民教育-出卷网-（2019） 从社会中来 番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵害。当番木瓜受到这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。 非转基因番木瓜 转基因番木瓜 第三章 基因工程 基因工程 就是按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做重组DNA技术。 原 理： 基因重组 操作水平： DNA分子水平 结 果： 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的生物类型和生物产品 从社会中来 番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵害。当番木瓜受到这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。 DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？ 非转基因番木瓜 转基因番木瓜 3.1 重组DNA技术的基本工具 学习目标： 阐明重组DNA技术所需的三种基本工具的作用。 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 课标要求： 理解基因工程是一种重组DNA技术，阐明限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体三种基本工具的特点及在实现重组DNA中的作用。 3.1 重组DNA技术的基本工具 重组DNA技术的基本工具： （三）分子运输车--载体 分子运输车 （一）分子手术刀--限制性内切核酸酶 分子手术刀 （二）分子缝合针--DNA连接酶 （一）分子手术刀--限制性内切核酸酶（限制酶） 1、来源： 主要从原核生物中分离纯化来的 3、特点 : 4、作用部位: 特定切点上的磷酸二酯键 5、结果： 形成黏性末端和平末端 2、种类： 数千种 能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。 （1）限制酶的识别序列 限制酶所识别序列的特点是：呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ，称为回文序列 能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列： 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 3’端 5’端 3’端 5’端 （2）限制酶作用部位: 黏性末端 黏性末端 （3）EcoRI 限制酶的切割: 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 EcoRI 只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 中轴线 （4）SmaI 限制酶的作用 SmaI只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 在C和G之间切开 练一练 B 1、要想获得某个特定性状的基因必须要 用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 2、如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端 供体生物细胞 取出DNA 限制酶 目的基因 想一想 模拟EcoRI限制酶（识别GAATTC序列，在G和A之间切）将手中两个DNA分子进行切割。 小组合作：模拟限制酶的剪切 1、你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？ 原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割 ... ...
