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课件网) 胞 动 物 细 动物细胞培养 第1课时 Animal cell culture 授课教师：XXX 第2章 细胞工程 生命观念 运用稳态与平衡观，分析动物细胞培养的条件。 学习目标 科学思维 采用归纳与概括、演绎与推理等方法，用文字和图示说明动物细胞培养的过程。 社会责任 对干细胞培养用于人类疾病治疗等社会热点问题进行科学评价。 2.动物细胞工程的发展历程 1890年 首例胚胎移植成功 1907年 首创动物组织体外培养法 1951年 发现哺乳动物精子获能现象 1958年 体细胞核移植成功 1981年 分离和培养小鼠胚胎干细胞 1978年 胚胎分割移植成功 1975年 创立单克隆抗体技术 1959年 试管家兔诞生 1996年 克隆羊多莉诞生 2006年 获得诱导多能干细胞 2014年 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 2017年 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞工程的基础 动物细胞融合 动物细胞核移植 克隆皮肤 单克隆抗体 克隆猴：中中和华华 从社会中来 小面积烧伤：患者通过切除 + 植皮(自身)后恢复。 大面积烧伤？ 皮肤的自体移植 使用他人皮肤如何？ 患者自身的不够用，如何解决？ 培养自身细胞？ 通过细胞培养 构建的人造皮肤 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。 动物细胞培养 1、概念 指动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后， 放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖的技术。 2、原理 细胞增殖(有丝分裂) 3、培养对象 胚胎或幼龄动物的细胞 4、目的 获得细胞或者细胞产物 5、地位 动物细胞工程的基础 胚胎或幼龄动物的细胞较成体的细胞更易培养，因为这些组织或细胞的生命力旺盛，分化程度低，分裂能力强，容易培养 一、动物细胞培养的条件 糖类、氨基酸 无机盐、维生素… … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 + 合成培养基 血清 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 一般使用液体培养基，也称培养液。 如何维持无菌、无毒的环境？ 适宜的温度、pH和渗透压分别是多少？ 适宜的气体环境包括？分别有什么作用？如何保持该气体环境？ 环境、培养液、培养环境；定期更换培养液；抗生素等 温度：（36.5±0.5）℃ pH7.2-7.2 适宜的渗透压 95%空气和5%CO2;培养皿或松盖培养瓶。 动物细胞培养所需基本条件 营养条件 其他条件 一、动物细胞培养的条件 糖类、氨基酸 无机盐、维生素… … 动物细胞培养所需基本条件 营养条件 其他条件 1、营养条件 合成培养基 将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。 通常需加入血清和血浆等一些天然成分。 培养动物细胞一般用液体培养基，也称培养液。 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 一、动物细胞培养的条件 2、无菌、无毒的环境 无菌：无菌操作—防止培养过程中的微生物污染；培养液中添加抗生素。 无毒：定期更换培养液—清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞造成危害。 3、温度、pH和渗透压 4、气体环境 温度：36.5±0.5℃ pH：7.2-7.4 渗透压：维持细胞正常形态 用培养皿或松盖培养瓶，在95%空气和5 %CO2 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 气体的组成及作用： O2： CO2： 细胞代谢所必需 维持培养液的pH 二、动物细胞培养的过程 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 放入CO2培养箱中培养 取动物组织 制成细胞悬液 原代培养 原代培养 放入CO2培养箱中培养 取动物组织 制成细胞悬液 转入培养液进行原代培养 分瓶 进行传代培养 细胞贴壁 接触抑制 二、 ... ...
