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课件网) 动物细胞培养 第2节 第1课时 第2章 细胞工程 人教版高中生物 选择性必修3 1 阐明动物细胞培养的条件和过程(重点)。 2 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值(重点)。 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。怎么办？ 问题探讨 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增；目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤；既解决了来源不足，又不会产生排斥反应 通过细胞培养构建的人造皮肤 > < 目标一 动物细胞培养的条件和过程 1.1 动物细胞培养的概念、原理 操作原因： 原理： 细胞增殖 幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？ 将组织块分散成单个细胞后，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出。 幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养。原因是这些细胞分裂能力强。 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 1.2 动物细胞培养的条件 培养基的构成： 一般使用液体培养基，也称为培养液 + 合成培养基 血清等天然成分 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … … 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基 含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质。 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 ①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以_____为宜； ②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为_____ ； ③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。 1.2 动物细胞培养的条件 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … … 定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 ①培养液、培养用具：灭菌处理； ②在无菌环境下进行操作； 95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … … 1.2 动物细胞培养的条件 CO2培养箱 维持培养液的pH 5%CO2 O2：细胞代谢所必需 培养皿 松盖培养瓶 培养容器： 1.3 动物细胞培养的过程 悬浮培养的细胞:直接用离心法收集 贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集 取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 分散成单个细胞 解决 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 接触抑制 传代培养 制成细胞悬液 原代培养 分瓶 培养 加培养液 在培养皿或培养瓶内 细胞分裂受阻 ② 制成细胞悬液，分瓶培养 ① 收集细胞 1．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？为什么？ 蛋白质。 不可以用胃蛋白酶。 多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶(适宜pH为1.5左右)在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适用于细胞培养时的处理。 活动1 分析动物细胞培养 2．“细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止分裂繁殖，出现接触抑制的现象”。试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因。 癌细胞；癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少 圆球形细胞刚开始 铺展贴壁生长 （100×） 培养的动物细胞贴壁生长并进行有丝分裂（100×） 细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×） 单层细胞 多层细胞 活动1 分析动物细胞 ... ...
