选填题探析十七 基因工程 【考情分析】 1.考查题型:基因工程的命题多以简答题呈现。 2.考查趋势:以大学教材知识或最新的文献资料为情境考查基因工程。 考点1 基因操作的基本工具及过程 【知识归纳】 1.基因工程的基本工具 2.基因工程的操作步骤 【高考真题】 1.(2024·山东卷,T13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法正确的是( )。 A.整个提取过程中可以不使用离心机 B.研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后,应充分摇匀再倒入烧杯中 C.鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变 D.仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰 2.(2024·新课标卷,T35)某研究小组将纤维素酶基因(N)插入某种细菌(B1)的基因组中,构建高效降解纤维素的菌株(B2)。该小组在含有N基因的质粒中插入B1基因组的M1与M2片段;再经限制酶切割获得含N基因的片段甲,片段甲两端分别为M1与M2;利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术将片段甲插入B1的基因组,得到菌株B2。酶切位点(Ⅰ~Ⅳ)、引物(P1~P4)的结合位置、片段甲替换区如图所示,“→”表示引物5'→3'方向。回答下列问题: (1)限制酶切割的化学键是 。为保证N基因能在菌株B2中表达,在构建片段甲时,应将M1与M2片段分别插入质粒的Ⅰ和Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ酶切位点之间,原因是 。 (2)CRISPR/Cas9技术可以切割细菌B1基因组中与向导RNA结合的DNA。向导RNA与B1基因组DNA互补配对可以形成的碱基对有G—C和 。 (3)用引物P1和P2进行PCR可验证片段甲插入了细菌B1基因组,所用的模板是 ;若用该模板与引物P3和P4进行PCR,实验结果是 。 (4)与秸秆焚烧相比,利用高效降解纤维素的细菌处理秸秆的优点是 (答出2点即可)。 【考向速清】 (1)[2023·辽宁卷,T25(2)]PCR中使用的聚合酶属于以DNA为模板的DNA聚合酶。 ( ) (2)[2023·江苏卷,T22(4)]转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选,抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落。 ( ) (3)[2023·河北卷,T22(2)]超表达载体的基本组件包括复制原点、目的基因、标记基因、 和 等。 (4)[2023·河北卷,T22(3)]PCR扩增时引物通过 原则与模板特异性结合。 【对点强化】 1.(原创)肉桂醇脱氢酶(CAD)是植物体内木质素生物合成途径中的关键酶。为进一步揭示云南松木质素生物合成的分子机制,科研人员利用实时荧光逆转录PCR技术(RT-qPCR)分析CAD家族基因在不同组织中的表达模式。下列说法正确的是( )。 A.RT-qPCR可以直接测定云南松CAD基因的数量 B.用于RT-qPCR的引物应只与CAD基因转录的mRNA互补配对 C.在RT-qPCR过程中,用到的原料核苷酸有4种 D.CAD在不同组织中的含量差异体现了基因的选择性表达 2.(2024·安徽安庆模拟)下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是( )。 A.②的构建需要限制酶和DNA聚合酶参与 B.③导入④后,重组Ti质粒整合到④的染色体DNA上 C.②到③过程,需要钙离子处理,有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中 D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了不可遗传变异 3.(2024·黑龙江大庆模拟)通过PCR的定点诱变技术获得的改良基因两侧的碱基序列和大肠杆菌的质粒(有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点)结构如下图所示,研究者欲将改良基因导入大肠杆菌的质粒中保存。下列叙述正确的是( )。 A.使用PCR技术扩增时需要一种引物、四种脱氧核苷酸及Mg2+等 B.实现质粒和改良基因的高效连接应选用限制酶SmaⅠ C.在含氨苄青霉素和β-半乳糖苷的培养基上,白色菌落的大肠杆菌含重组质粒 D.构建重组质粒需用到的酶有XmaⅠ、NheⅠ和DNA连接酶 考点2 蛋白质工程 【知识归纳】 【高考真题】 (2022·重庆卷,T3)将人胰岛素A链上1个天冬氨酸替换为甘氨酸,B链末端增加2个精氨酸,可制备出 ... ...
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