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课件网) （二）微生物的选择培养和计数 第2节 微生物的培养技术及应用 02 能概述测定微生物数量的常用方法。 03 能尝试完成微生物选择培养及计数实验的操作。 01 能说出选择培养基的类型、配置方式。 学习 目标 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 回忆必修2开展的“探究抗生素对细菌的选择作用” 一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。在实验室连续培养细菌时，如果向培养基中添加抗生素，耐药菌有可能存活下来。 通过观察细菌在含有抗生素的培养基上的生长状况，探究抗生素对细菌的选择作用。 一、选择培养基 1.概念： 基础培养基 选择培养基 +某种抗生素 接种培养 培养结果 上述过程能否充分说明该选择培养基具有选择性？ 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 1.概念： 设置基础培养基或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。 怎么证明一个选择培养基具有选择性？ 基础培养基 选择培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 1.概念： 类型 条件 分离得到的菌种 改变培养条件 高温环境 水生栖热菌等 高盐环境 金黄色葡萄球菌等耐盐菌 添加某种化学物质 加入青霉素 酵母菌、霉菌等真菌 特殊碳源、氮源 尿素是唯一氮源 能分解尿素的微生物 石油是唯一碳源 能消除石油污染的微生物 营养缺陷 不加碳源 自养型微生物 不加氮源 固氮菌 2.选择培养基的类型 常见的分解尿素的微生物：芽孢杆菌、小球菌、棒状杆菌等细菌。 CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 脲酶 3.选择培养基的配方设计 如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基一 KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 培养基二 选择哪种培养基更合适？ 可作为完全培养基 （起对照作用） 以尿素作为唯一氮源设计选择培养基，可以将分解尿素的细菌分离出来。 1. 如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来， 培养基的配方该如何设计？ 讨 论: 这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 选择培养基平板准备好，还需要准备什么？ 土壤微生物 细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表3~8cm的土壤层。铲去表层土3cm左右，取样，将样品装入事先准备好的信封中。 二、微生物的选择培养 土壤收集后能不能直接倒入平板内培养？应该怎么操作？ 将土样加入盛有无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，取菌液加入平板内培养。 图1 完全培养基 图2 选择培养基 配制菌液土样时取多少？无菌水加多少？培养时取多少液体？ 土壤细菌的数量庞大，要想得到特定微生物的纯培养物，需要对土壤进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上。 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面的方法。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。 稀释涂布平板法 A.梯度稀释菌液 B.涂布平板 主要操作: (1)样品梯度稀释： ① 在火焰旁称取土壤10g, 加入90ml 无菌水中， 摇匀，制成稀释10倍的土壤菌液。 ②取6支试管， ... ...
