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课件网) 2.3 课时3 动物细胞 融合技术及其应用 能阐述动物细胞融合技术的概念,举例说出诱导动物细胞融合的方法。 01 能概括干细胞的类型和特点。 03 能概述单克隆抗体的制备过程。 02 能简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。 04 植物体细胞杂交 植物细胞融合 植物组织培养 植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障,克服远缘杂交不亲和的障碍,培育出新的作物类型。 温故而知新 有没有技术让不同种动物的体细胞杂交,培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢? 一、动物细胞融合技术 在一定的条件下将两个或多个动物细胞,通过物理、化学或生物方法,结合形成一个细胞的技术。 细胞膜的流动性 1、概念: 2、原理: 3、诱导方式 物理法:电融合法 化学法:聚乙二醇(PEG) 生物法:灭活病毒诱导法 与植物原生质体融合的方法相同 ———动物细胞融合特有 自发融合 缺点:频率极低。 人为促进细胞融合 ①生物方法: a.诱导物:灭活的病毒,如仙台病毒、疱疹病毒、腮腺炎病毒等。 3.动物细胞融合———诱导方法 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性(不感染细胞) 保留融合活性(诱导细胞融合) ★思考:什么是病毒的灭活? 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力,但是并不破坏病毒的抗原结构。 ★为什么能用灭活的病毒进行动物细胞膜的融合? 动物细胞融合所特有的融合方式 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 ↓ 细胞膜被病毒颗粒穿通 ↓ 细胞膜连接 ↓ 细胞核融合,形成杂交细胞 灭活原理: 灭活的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞质膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝聚,细胞质膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞质膜打开,细胞发生融合 b.诱导机理:病毒可以与细胞质膜发生作用,使细胞紧密凝集,直至融合。 c.缺点:病毒进入细胞后,可能会对细胞的 产生一定的干扰。 生命活动 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程: ②化学方法 a.诱导剂:聚乙二醇。 b.局限性:有一定的毒性,对某些细胞(如卵细胞)不适用。 ③物理方法 a.诱导方法:电场诱导融合法。 b.优点:对细胞伤害小,易操作、控制和观察。 3.动物细胞融合———诱导方法 动物细胞A 动物细胞B 动物细胞_____ _____ 法诱导 培养 物理 化学 生物 杂交细胞(单核) 膜融合质融合 ①融合过程:细胞膜融合→细胞质融合→ _____融合。 ②细胞膜融合的过程体现出细胞质膜具有_____。 ③融合后杂交细胞的特点: 具有_____,杂交细胞表现出两个_____的特点。 ④融合后的杂交细胞经过 _____后仍能形成两个完整的杂交细胞 细胞核 一定的流动性 亲本细胞 有丝分裂 4.动物细胞融合的过程 两种细胞的遗传信息 5.诱导细胞融合的机理 在各种方法的促融合作用下,细胞质膜出现 、 和 ,进而发生细胞质融合和细胞核的融合,最终形成 。 6.融合结果 人工诱导细胞融合后,可能产生 类型的细胞,因此需要对细胞进行 ,挑选出所需要的细胞。 多种 筛选 粘连 破裂 融合 杂交细胞 7.意义: 突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。 8.应用: (1)细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 (2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。 至今,种间、属间、科间,甚至动植物之间融合都已获得了成功。 生物种类 细胞来源 成功年代 酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年 人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年 人—小鼠 纤维肉瘤细胞———畸胎瘤细胞 1978年 正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞 正在融合的鸡血细胞 【核心探讨】 1.19世纪30年代,科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中 ... ...