1.2微生物的基本培养技术（第2课时微生物的纯培养）课件(共26张PPT3份视频) 2024-2025学年人教版（2019)高中生物学选择性必修3

(课件网) 第2节 微生物的培养技术与应用（一)微生物的基本培养技术（2） (1)培养物： (3)纯培养： (2)纯培养物： 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。 由单一个体繁殖所获得的微生物群体。 获得纯培养物的过程就是纯培养。 （1）配制培养基 （2）灭菌(培养基和器具） （3）接种 （4）分离 （5）培养(恒温箱） （三）微生物的纯培养 1 有关概念 2纯培养步骤： 【探究 实践】酵母菌的纯培养 分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。 (1)菌落： 1. 原理： 微生物群 分散或稀释 单个细胞 单个菌落 繁殖 念珠菌显色培养基 大肠杆菌培养基 酵母菌培养基 金黄色葡萄球菌和 枯草杆菌培养基 (2)单菌落： 一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 鉴别菌种：菌落的大小、形状、颜色、透明度、光泽度等是鉴定菌种的重要依据。 (3)获得单菌落的方法： 平板划线法和稀释涂布平板法 稀释涂布平板法 平板划线法 2. 实验目的 ① 学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板 ② 学会进行无菌操作 ③ 尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落 3. 材料用具 ①酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、蒸馏水 ②天平，小刀，纱布，烧杯，锥形瓶，棉塞、牛皮纸（或报纸） ③皮筋，培养皿，接种环，酒精灯，超净工作台 ④高压蒸汽灭菌锅，干热灭菌箱和恒温培养箱等 4.方法步骤 （1）制备培养基 ① 配制培养基 去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000mL。 ② 灭菌： 培养基———高压蒸汽灭菌 高压蒸汽灭菌锅 转移 灭菌15~30min 皮筋勒紧 包牛皮纸 放入高压蒸汽灭菌锅中（100kPa、121℃） 酵母菌培养基 锥形瓶 加棉塞 ② 灭菌： 培养皿———干热灭菌 干热灭菌箱 将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160～170℃灭菌2h。 培养基冷却到50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板。 1 拔出锥形瓶的棉塞。 3 用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿（10～20mL），立即盖上皿盖。 4 等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。 2 将瓶口迅速通过火焰。 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基 不能完全打开，以免杂菌污染培养基 防止皿盖上冷凝水落入培养基 ；避免培养基的水分过快挥发。 ③倒平板 配制培养基 灭菌 倒平板 （1）制备培养基 应该在定容完成后，灭菌之前进行调pH 1. 培养基pH要适宜，调pH是在灭菌前还是灭菌后？ 问题思考与分析： 4. 怎样检测培养基灭菌是否合格(或培养基是否被杂菌污染）？ 将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落产生 3. 在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 最好不要用。空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 2.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？ 用手触摸锥形瓶，刚刚不烫手即可 【例】倒平板是制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的重要环节，如图为倒平板的操作示意图。 （1）请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程： 。 （2）甲、乙、丙中的灭菌方法是 。 （3）丁中的操作需要等待 才能进行。 丙→乙→甲→丁 灼烧灭菌 平板冷却凝固 （2）接种和分离酵母菌 ———平板划线法 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。 连续划线法 分区划线法 平板划线法 ... ...