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课件网) 3.3 DNA的复制 复习 DNA的基础知识 ①DNA复制的时期？ ②DNA复制的结果？ ③DNA是怎样进行复制的？ 分裂前的间期 DNA数目的翻倍 提出问题 一、对DNA复制的推测（P53） 1.沃森和克里克提出了遗传物质自我复制的假说： ①DNA复制，DNA双螺旋 ，互补的碱基之间的 断裂。 ②解开的两条单链分别作为复制的 ，游离的脱氧核苷酸根据 原则，通过形成氢键，结合到作为模板的单链上。 ③新合成的每个DNA分子中，都保留了原来DNA分子中的一条链，因此，这种复制方式称作 。 解开 氢键 模板 碱基互补配对 半保留复制 特点：一模一样 一新一旧 作出假说 一、对DNA复制的推测（P53） 2.其他观点———全保留复制、分散复制 ①全保留复制： 以两条母链为模板合成两条DNA子链，子代DNA中母链重新结合，两条子链彼此结合成另一个子代DNA分子。 ②分散/弥散复制： 亲代DNA双链被切成片段，分散在新合成的子代DNA双链中。 Q：区分亲代与子代的DNA？ 阅读课本P53-54，思考与讨论： ①如何跟踪研究看不见的DNA（区分母链和子链）？ ②该实验用什么元素做标记？还可以用其他元素？ ③如何区分质量不同的DNA？ 同位素标记法 15N和14N（核酸中N原子数最少，最容易完全标记，可防止因出现部分标记产物而干扰结果，CHO原子数太多，需要更长时间才能达到完全标记） 密度梯度离心技术（含15N的DNA比含14N的DNA密度大；利用离心技术可以在试管中区分不同N元素的DNA分子） Q：能不能通过检测放射性来区分开？ 梅塞尔森 斯塔尔 1958年 大肠杆菌 同位素标记技术 密度梯度离心技术 + （选材优点：20min繁殖一代，DNA裸露，易操作） 二、DNA半保留复制的实验证据（P53） 15N/14N—DNA 15N/15N—DNA 14N/14N—DNA 重密度带 中密度带 低密度带 Q：如何让DNA被15N或14N标记上？ 1.实验方法：同位素标记技术+密度梯度离心技术 二、DNA半保留复制的实验证据（P53） 演绎推理 ①用含有15NH4Cl的培养液培养大肠杆菌，让大肠杆菌繁殖若干代中生长若干代。 ②将大肠杆菌转移到含有14NH4Cl的普通培养液中，在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA，进行离心，记录离心后试管中DNA的位置。 得到的大肠杆菌DNA几乎都是15N标记的（亲代）。 15N/ 15N —DNA 14NH4Cl 再分裂一次 分裂一次 提取DNA 离心 提取DNA 离心 2.实验步骤： 二、DNA半保留复制的实验证据（P53） 演绎推理 ①全保留复制： P： F1： F2： 细胞再 分裂一次 转移到含14NH4Cl的培养液中 细胞分裂一次 提取DNA，离心 提取DNA，离心 提取DNA，离心 高密度带 高密度带 低密度带 高密度带 低密度带 15N 15N 15N 15N 14N 14N 15N 15N 14N 14N 14N 14N 14N 14N 二、DNA半保留复制的实验证据（P53） 演绎推理 细胞再 分裂一次 转移到含14NH4Cl的培养液中 细胞分裂一次 提取DNA，离心 提取DNA，离心 提取DNA，离心 高密度带 中密度带 低密度带 中密度带 P： F1： F2： 15N 15N 15N 14N 15N 14N 15N 14N 14N 14N 15N 14N 14N 14N ②半保留复制： 二、DNA半保留复制的实验证据（P53） 演绎推理 ③分散复制： P： F1： F2： 细胞再 分裂一次 15N 15N 转移到含14NH4Cl的培养液中 细胞分裂一次 提取DNA，离心 提取DNA，离心 提取DNA，离心 高密度带 中密度带 15N 14N 15N 14N 中密度带 二、DNA半保留复制的实验证据（P53） 实验验证 子二代：中带:轻带=1:1 15N/15N-DNA 亲代：重带 15N/14N-DNA 子一代：中带 15N/14N-DNA 14N/14N-DNA ×排除全保留复制 ×排除分散复制 得出结论：DNA的复制方式为半保留复制！ 总结归纳 ①实验者： ②实验材料： ③实验方法： ④实验结果： ⑤研究方法： 同位素标记技术、密度梯度离心技术 DNA是半保留复制 梅塞尔森、斯塔尔 大肠 ... ...
