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课件网) 课前复习 课前复习 1907年，哈里森用一滴淋巴液成功培养了蝌蚪的神经元，首创了动物组织体外培养法。 1951年，张明觉等发现了哺乳动物精子获能现象。 1959年，试管家兔诞生。之后，多种试管动物相继出生。 1958年，格登用非洲爪蟾进行体细胞核实验，同期，我国科学家童第周开展了鱼类细 胞核移植工作。 1975年，米尔斯坦和科勒等创立了单克隆抗体技术。 1978年，小鼠的桑椹胚被成功分割。次年，科学家分割绵羊胚胎获得了同卵羔羊 1981年，埃文斯等成功分离和培养了小鼠的胚胎干细胞 2006年，山中伸弥等获得了诱导多能干细胞。我国科学家用这种细胞培育了小鼠。 2014年，世界上第一个用单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿在我国诞生。 2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。 1890年，希普将安哥拉兔的胚胎移入比利时的输卵管内，得到了两只安哥拉兔，这是 世界上胚胎移植成功的首例。 2.2 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植 动物细胞工程 基础 一、动物细胞培养（P43） 1.概念 指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2.原理 细胞增殖（有丝分裂） 3.结果 获得细胞群 联系 植物组织培养： 将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。 动物组织培养： 指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 Q：需要哪些必要条件？ 知识回顾：选择性必修一第1章第1节 一、动物细胞培养（P43） 4.动物细胞培养条件 ⑴营养： 水、糖类（葡萄糖）、氨基酸、无机盐、维生素等。 ①已知成分：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基，称为合成培养基。 ②未知成分：使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。血清中含有人类尚未全部研究清楚、细胞生长和增殖所必需的物质。 + 合成培养基 血清 ps：培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。 一、动物细胞培养（P43） 4.动物细胞培养条件 ⑵无菌、无毒的环境： 无菌 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 无毒 湿热灭菌 干热灭菌 灼烧灭菌 有毒物质 ①定期更换培养液，以便清除代谢物 （防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害） ②添加一定量的抗生素（防止细菌） 一、动物细胞培养（P43） 4.动物细胞培养条件 ⑶温度、pH和渗透压： ①适宜的温度： 哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜。 ②适宜的pH： 多数动物细胞生存的适宜pH为7.2-7.4。 ③适宜的渗透压： 维持细胞正常的形态和功能。 CO2培养箱 一、动物细胞培养（P43） 4.动物细胞培养条件 ⑷气体环境： ①O2：细胞代谢所必需的。 ②CO2：主要作用是维持培养液的pH。 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 造成培养基pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2 ，为了解决这一问题，可采用开放式培养的方式，使细胞代谢产生的CO2 及时溢出培养器皿，再通过给培养箱提供恒定的5%的CO2 浓度，使之与培养基中的NaHCO3 处于平衡状态，调节pH的相对稳定。95%的空气可以保证细胞呼吸对氧气的需要。（解释） 一、动物细胞培养（P43） 5.动物细胞培养的过程 一、动物细胞培养（P43） 5.动物细胞培养的过程 ①取动物组织 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 ②分散成单个细胞 ⑤传代培养 ③制成细胞悬液 ④原代培养 ps：幼龄动物或动物的胚胎 拓展 Q1：进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是 ... ...
