1.2.2微生物的选择培养和计数导学案（有解析） 2024-2025学年人教版（2019）高中生物学选择性必修3

1.2.2微生物的选择培养和计数 导学案 一、核心素养 1.生命观念：理解微生物选择培养和计数的原理，认识微生物在不同环境中的生存策略和数量变化对生态系统的影响。 2.科学思维：通过分析选择培养基的配方和微生物计数方法的原理，培养逻辑推理、批判性思维和模型构建能力。 3.科学探究：开展微生物选择培养和计数的实验，学会实验设计、数据收集与分析，提升科学探究能力。 4.社会责任：关注微生物选择培养和计数技术在工业、农业、医疗及环境保护等领域的应用，增强对生物技术安全性和伦理问题的认识。 二、教学重难点 教学重点 1.选择培养基的作用原理及制备方法。 2.稀释涂布平板法和显微镜直接计数法等微生物计数方法的操作及原理。 3.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验。 教学难点 1.理解选择培养基中特定成分对微生物的选择作用机制。 2.掌握微生物计数方法的误差分析及实验结果的正确处理。 三、自主预习 选择培养基 1.概念：在微生物学中，将允许_____种类的微生物生长，同时抑制或阻止_____种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 2.选择机制： 利用微生物对某种_____的特殊需求，例如，在培养基中加入_____，可筛选能分解尿素的细菌。因为只有能合成_____的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。 参考答案： 特定；其他； 营养物质；尿素；脲酶 （二）微生物的计数 1.显微镜直接计数法 原理：利用特定的_____，在显微镜下直接对微生物进行计数。计数室是一个特制的载玻片，上面有精确划分的小方格，每个小方格的体积是已知的。将稀释后的菌液滴加到计数室，通过统计小方格内的微生物数量，再根据菌液的稀释倍数和小方格的体积，计算出单位体积样品中的微生物总数。 操作步骤： 制作装片：将清洁干燥的血细胞计数板放在载物台上，用_____吸取少量充分混匀的菌液，从计数板_____边缘滴一小滴，让菌液自行渗入计数室，注意不可有气泡产生。 计数：在显微镜下，根据_____原则，对计数室内不同位置的小方格中的微生物进行计数。对于压在小方格线上的微生物，一般只计数_____的个体。 计算：若计数室的长和宽各为 1mm，深度为 0.1mm，每个小方格的面积为_____mm ，菌液稀释倍数为 n，5 个中方格（每个中方格含 25 个小方格）内的微生物总数为 a，则 1mL 菌液中的微生物数量为_____个。 优点与缺点： 优点：操作_____，能快速得出结果，可用于观察微生物的形态和结构。 缺点：不能区分死菌与活菌，会导致计数结果比实际活菌数_____。 2.稀释涂布平板法 原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个_____，来源于样品稀释液中的一个_____。通过统计平板上的菌落数，根据公式计算出样品中的活菌数目。统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 操作步骤： 样品稀释：将待分离的样品进行一系列梯度稀释，通常采用_____稀释法，如 10 、10 、10 等不同稀释度。稀释度的选择要合适，一般以每个平板上出现_____个菌落为宜。 涂布平板：用_____将不同稀释度的菌液分别均匀涂布到固体培养基表面。涂布时，要注意将涂布器进行_____灭菌，冷却后再蘸取菌液进行涂布。 培养与计数：将涂布好的平板放入适宜温度的培养箱中培养，待菌落长出后，选择菌落数在_____范围的平板进行计数。统计平板上的菌落数，根据公式：每克样品中的菌株数 =（同一稀释度 3 个平板上菌落数的平均值 ÷ 涂布平板时所用稀释液体积）× 稀释倍数，计算出样品中的活菌数。 注意事项： 为保证结果准确，一般选择菌落数在 30 - 300 的平板进行计数，同时每个稀释度至少涂布_____个平板，取平均值。 操作过程要严格遵循无菌技术，防止杂菌污染，影响计数结果。 参考答案： 计数板；滴 ... ...