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课件网) 第2章 细胞工程 2.1 植物细胞工程 2.2 动物细胞工程 2.3 胚胎工程 希普：首例胚胎移植成功 哈里森:首创动物组织体外培养法 张明觉：发现哺乳动物精子获能现象 格登、童第周：体细胞核移植成功 试管家兔诞生 米尔斯坦和科勒：创立单克隆抗体技术 胚胎分割移植成功 埃文斯：成功分离和培养小鼠的胚胎干细胞 克隆羊多莉诞生 山中伸弥：获得诱导多能干细胞 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。 1890年 1907年 1951年 1958年 1959年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 动物细胞工程的发展历程 科技探索之路 2.2动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 动物细胞培养需要哪些基本条件？ 动物细胞培养的基本操作过程是什么？ 本节聚焦 1 2 3 怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险？ 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 提示：可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。 那么： 怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 通过细胞培养构建的人造皮肤 【从社会中来】 人造皮肤：人体再生术的秘密 (2021江苏)新冠病毒通过S蛋白与细胞表面的ACE2受体结合,制备病毒灭活疫苗时，先大量培养表达 的细胞，再接入新冠病毒扩大培养，灭活处理后制备疫苗。 ACE2受体 操作原因： 原理： 对象： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 细胞增殖 一般是指动物胚胎或出生不久的幼龄动物组织，因为这些组织细胞比老龄动物的组织细胞生命力旺盛，易于培养，同时增殖能力也更强。 将组织块分散成单个细胞后，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出。 01 动物细胞培养的条件 1.动物细胞培养： 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基 含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。 培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分 一般使用液体培养基，也称为培养液 01 动物细胞培养的条件 2.培养条件： ①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以_____为宜； ②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为_____ ； ③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。 ①培养液、培养用具：灭菌处理； ②无菌操作；③适量添加抗生素 定期更换培养液，以便清除代谢物。 01 动物细胞培养的条件 2.培养条件： 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 维持培养液的pH 95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱 CO2培养箱 松盖培养瓶 01 动物细胞培养的条件 2.培养条件： O2：细胞代谢所必需 体外培养的动物细胞可以分为两大类： 一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖； 另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于这种类型，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。 悬浮培养瓶 02 动物细胞培养的过程 1.体外培养的动物细胞分类： 取动物组织 制成细胞悬液 转入培养液进行原代培养 放入CO2培养箱中培养 传代培养 放入CO2 培养箱中培养 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 02 动物细胞培养的过程 2.培养过程： 可以用胃蛋白酶处理吗？ 不可以，pH不适宜。 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，去掉组织间蛋白，将组 ... ...
