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第一章 微专题1 微生物筛选中的透明圈、变色圈、抑菌圈与生长圈(课件 学案 练习,共4份)浙科版(2019)选择性必修3 生物技术与工程
日期:2025-04-20
科目:生物
类型:高中课件
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来源:二一课件通
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第一章
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微专题1 微生物筛选中的透明圈、变色圈、抑菌圈与生长圈 题型1 透明圈 1.原理:在固体培养基中掺入可被特定菌利用的营养成分M,造成浑浊、不透明的培养基背景。同时加入能与M形成有色复合物的染色剂,待筛选菌的菌落周围会形成透明圈,透明圈直径/菌落直径比值的大小反映了菌落利用此物质(M)的能力。 2.实例:分离纤维素分解菌 纤维素能与刚果红形成红色复合物,但其水解产物纤维二糖和葡萄糖不能与刚果红形成红色复合物。在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红,接种土壤微生物培养,菌落周围出现透明圈,说明这些细菌能分解纤维素。 3.关键指标分析 例1 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%~60%能被土壤中产生纤维素酶的某些微生物分解利用。刚果红染液可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。在含有纤维素的培养基中加入刚果红,刚果红与纤维素形成红色复合物;而当纤维素被纤维素分解菌分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈(如图所示)。下列关于纤维素分解菌的分离与计数实验,叙述错误的是( ) A.分离纤维素分解菌的选择培养基应以纤维素为唯一碳源 B.对纤维素分解菌计数时应选择菌落数在30~300之间 C.采用稀释涂布平板法统计平板上菌落数,统计值比活菌实际数低 D.通过比较得知,菌落②中的菌株分解纤维素能力最强 例2 在某地的农业生产中,研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂是一种含氮有机物,在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。下列相关叙述正确的是( ) A.只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌 B.筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源 C.图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法,该方法可用于细菌计数 D.经过一段时间的培养,培养皿中应该只存在有透明圈的菌落 题型2 变色圈 1.原理: 将指示剂直接掺入固体培养基中,进行待筛选菌悬液的单菌落培养时,目的菌株代谢物使指示剂变色,在菌落周围形成变色圈。 2.实例 (1)分离尿素分解菌 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。接种土壤微生物(产生脲酶)培养,菌落周围出现红色,说明该细菌能够分解尿素。 CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3 NH3+酚红→红色 (2)分离谷氨酸产生菌 在分离谷氨酸产生菌时,可在培养基中加入溴百里酚蓝,它是一种酸碱指示剂,当pH在6.2以下时为黄色,pH 7.6以上为蓝色。若平板上出现产酸菌,其菌落周围会变成黄色,可以从这些产酸菌中筛选谷氨酸产生菌。 例3 科研人员利用溴甲酚紫变色圈法(溴甲酚紫在pH为5.2~6.8范围内,颜色会由黄色变为紫色)从镇江香醋的醋醅中分离出一株优良菌株H3,将菌株接种在不同浓度乙醇溶液中观察产酸量,结果如图,相关叙述正确的是( ) A.黄色的平板上出现紫色的变色圈,从中挑取长势良好的单菌落分离纯化 B.将菌株接种在不同浓度乙醇溶液中密封进行醋发酵 C.乙醇的体积分数过高的会损伤醋酸菌的线粒体,不利于其进行需氧呼吸 D.获得最大产酸量的乙醇体积分数在3%~6%之间 例4 变色圈法是一种对于一些不易产生透明圈产物的菌株的鉴别方法,可在底物平板中加入指示剂或显色剂,使所需微生物能被快速鉴别出来。如在筛选果胶酶产生菌时,用固体培养基对含微生物的样品进行分离,待菌落长成后,加入0.2%刚果红溶液染色4 h,具有分解果胶能力的菌落周围便会出现绛红色水解圈,如图所示。下列叙述错误的是( ) A.该培养基是以果胶为唯一碳源的选择培养基 B.该培养基上的接种方法为稀释涂布平板法 C.变色圈直径大 ... ...
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