3.2.2基因工程的基本操作程序（第2课时）课件（共35张PPT） 2024-2025学年人教版（2019）高中生物学选择性必修3

(课件网) 3.2 基因工程的基本操作程序 本节聚焦 1、基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？ 2、基因工程操作的每一步涉及的技术和方法有哪些？ 第二课时 获取了足够量的Bt基因后，下一步就是要让基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时，使Bt基因能够表达和发挥作用。 构建基因表达载体（核心工作） 基因表达载体由哪些部分组成 复习提问 目的基因的筛选与获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 第一步 第二步 第三步 第四步 目的基因的检测与鉴定 基因工程的基本操作程序 自主学习：阅读课本相关内容（P81），总结将目的基因导入受体细胞的方法有哪些，各个方法的原理是什么？各自适用于什么生物？ 温故知新 将目的基因导入受体细胞的方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法 ———显微注射法 ———Ca2+处理法 我国科学家独创 三、将目的基因导入受体细胞 转化：指目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内稳定维持和表达的过程。 三、将目的基因导入受体细胞 （一）导入植物细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法 (最多) 导入方法 1.花粉管通道法： 我国科学家独创 ①用_____将_____直接注入____中； 微量注射器 含目的基因的DNA溶液 子房 ②在植物受粉后的一定时间内，剪去____，将_____滴加在_____上，使目的基因借助_____进入_____； 柱头 DNA溶液 花柱切面 花粉管通道 胚囊 受体细胞： 受精卵 子房 花粉 柱头 花粉管 精子 卵细胞 胚囊 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程 2.农杆菌转化法 ①转化： ②农杆菌特点： a.能在自然条件下侵染_____和_____，而对大多数_____没有侵染能力； 双子叶植物 裸子植物 单子叶植物 b.农杆菌细胞内含有_____，当它侵染植物细胞后，能将_____上的_____（_____）转移到被侵染的细胞，并且将其_____； Ti质粒 Ti质粒 T-DNA 可转移的DNA 整合到该细胞的染色体DNA上 将目的基因插入_____中，通过农杆菌的_____作用，就可以使目的基因_____ ③利用农杆菌进行转化的思路： Ti质粒的T-DNA 转化 进入植物细胞 农杆菌转化法 插入外源基因的DNA 导入农杆菌 两次拼接： 第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上； 第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体的DNA上。 两次导入： 第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌； 第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞。 ⑤转化的具体方法： a.可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片_____，然后_____，并_____； 受体细胞为_____ 与农杆菌共培养 筛选转化细胞 再生成植株 体细胞 b.可以将____直接浸没在_____中一段时间，然后培养植株并获得____，再进行_____、_____等； 受体细胞为_____ 花序 含有农杆菌的溶液 种子 筛选 鉴定 受精卵 1.显微注射法 操作程序： 取受精卵 显微注射 胚胎移植 为什么常选用受精卵作为受体细胞呢？ 提纯基因表达载体 ①体积大，易操作。 ②全能性高，易培养成完整个体。 将目的基因导入受体细胞 三 将目的基因导入动物细胞 使用Ca2+处理： 可使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 过程 微生物作为受体细胞的优点： 繁殖快，单细胞，遗传物质相对较少，易于培养操作 Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 大肠杆菌细胞 将目的基因导入受体细胞 三 将目的基因导入微生物细胞 原核生物作为受体细胞产生的真核生物的蛋白质通常没有生物活性，需要在体外进行再加工。 生物 种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用 方法 农杆菌转化法; ... ...