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课件网) 1997年，我国政府首次批准商 业化种植转基因抗虫棉。到2015年， 我国已育成转基因抗虫棉新品种100 多个，减少农药用量40万吨，增收 节支社会经济效益450亿元。 你知道转基因抗虫棉抗虫的机制是什么吗 P77 从社会中来 转基因抗虫棉与普通棉花 普通棉花 (无抗虫特性) 3.将目的基因 导入受体细胞 导入 棉花细胞 表达Bt基因 Bt基因 重组DNA 分子 抗虫棉 4.目的基因的 检测与鉴定 与载体拼接 2.基因表达 载体的构建 1.目的基因的 筛选与获取 苏云金杆菌 提取 第3章基因工程 第2节基因工程的基本操作程序 取出质粒 用限制酶切断DNA 用连接酶连接目的基因 连接酶 高二生物组 本节主要解决的困惑 1.利用PCR获取和扩增目的基因 2.基因表达载体的构建过程 原核细胞 真核细胞 不同点 编码区是 连续_的 编码区是间隔 的 、不连续的 相同点 都由能够编码蛋白质的 编码区和具有调控作用的 非编码区组成的 非编码区：不能编码蛋白质，调控遗 真核细胞基因的结构示意图 传信息的表达 包括：编码区上游编码区下游 点 录 终 转 点 录 起 转 非编码区 编码区(转录区) 非编码区 启动子 终止子 转录 转录 起点 终点 非编码区 非编码区 编码区(转录区) 启动子 终止子 知识回顾1:基因的结构 编码区：编码蛋白质的合成 原核细胞基因的结构示意图 知识回顾1:基因的结构 名称 功能 位置 序列特征 转 录 因 子 结 合 对 g e n e 表 达 的 影 响 启动子 启动gene的转录 gene的5'端上游 具有特定的序列特征，如 原核生物的启动子具 有-10和-35区域，终止子 具有特定的终止信号 与RNA聚合酶及其 他转录因子结合 正向调控gene表达 终止子 终止gene的转录 gene的3'端下游 不需要 负向调控gene表达 内含子 在转录后被剪接掉， 不参与编码蛋白质 gene内部，被外显子分隔 内含子通常在5'和3'端具 有剪接位点，而外显子则 包含编码序列 不需要 两者兼有 外显子 编码蛋白质的序列， 转录后保留在mRNA 中 gene内部，编码区域的一部分 不需要 两者兼有 增强子 增强特定gene的转录 活性 可以位于gene的任何位置，包 括上游、下游或内部 含有特定的调控序列，可 以与转录因子结合 与增强子结合蛋白 (如转录激huo因 子 ) 结 合 正向调控gene表达 沉默子 降低特定gene的转录 活性 可以位于gene的任何位置，包 括远高gene的区域 与沉默因子结合 负向调控gene表达 需要细胞提供能量 需要解旋酶的作用 结果：氢键断裂，双链打开 游离的脱氧核苷酸 5' DNA解 旋 酶 知识回顾2:DNA的复制过程 2 =2 # # z =4 #####z =8 DNA 聚 合 酶 新合成的子链 DNA 聚 合 酶 合成子链 解 旋 — 知识回顾3:基因的表达 转录 RNA 加工 ■AAAA AAAA 翻译 细胞质 细胞核 内含子 外显子 DNA mRNA 蛋白质 真核细胞与原核细胞中基因表达过程示意图 mRNA mRNA 蛋白质 DNA RNA 转录 翻译 3.同种生物的不同细胞中，由于基因的选择性表达，mRNA的种类和数量 一般是不相同的，但tRNA和rRNA的种类一般没有差异。 基因B 3'- 5' 5'- 3' 基因A 基因C 模板链 非模板链 1 转录时，DNA链完全解开吗 整个DNA都转录 边解旋边转录 转录不是转录整个DNA,是转录其中要表达的基因，以基因的一条链为模板， 2不同基因的模版链是否相同 点拨提升1 不同基因模板链不同 ①原核生物细胞里没有相应的 酶 来去除内含子； ②原核生物没有真核的蛋白质 加工系统(如内质网、高尔基 体 等 ) 真核基因：编码区(外显子+ 内含子) 前体mRNA 一般不能产生原来的蛋白质 【思考1】:如果把一个真核生物的基因导入原核细胞中表达， 一 定会产生原来的蛋白质吗 相应酶去除内含子 成 熟mRN 成熟 翻译 mRNA A Eis 内含子 外显子 转录 多肽链 蛋白质 深度思考 加工 内含子 外显 ... ...
