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课件网) 第三章第一节 重组DNA 技术的基本工具 gene of interest clone gene of interest into T;plasmid(making it recombinant) results in a recombinant plant recombinant plant G >C blunt ends (b)blunt end cutting plant cell G cut C G isolate plasmid Agrobacterium tumefaciens transform recombinant DNA back to A.tumefaciens T0NA T;plasmid infect plant cell with A.tumefaciens A T C C 3' C< G C< G□ G C 5’ C< G G T A G G 5' cut sticky ends G cut cut Haelll C< C< 3' C< G C< G (a)sticky end cutting 十 G T( A G T-DNA region T;plasmid A T C C C >C□ A T C G A G G cellular DNA G G 01 重组DNA技术所需的三种基本工具是什么 他们的作用分别是什么 02 基因工程载体需要具备什么条件 本节聚焦 从社会中来 木瓜是一种非常健康的热 带水果，它富含17种以上 氨基酸及钙、铁等，还含 有木瓜蛋白酶、番木瓜碱 等营养物质，具有抗氧化 功能，可以减少炎症，抗 击疾病，并帮助我们保持 机体年轻功能。 ■转基因番木瓜的获得需要依赖什么工程技术 基因工程和植物组织培养技术 ■什么是基因工程 DNA 双螺旋的直径仅2nm, 科学家如何操作编辑基因 DNA sequence of inerest DNAof interest 操作对象 ： Open vecter Vecter containing Wecter DNA cf intereut 结 果 ： 赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。 定向改造生物性状；克服远缘杂交不亲和障碍。 基因工程 基因工程：是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性， 创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于 基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫重组DNA技术。 基因重组 基因 分子水平 操 作 水 平 ： 原 理 ： 意义 ： 基因工程理论基础 ■ 为什么不同生物的DNA 分子能拼接起来 (1)DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。 (2)双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。 ■ 为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内 表达 (1)基因是控制生物性状的独立遗传单位。 (2)遗传信息的传递都遵循中心法则。 (3)生物界共用一套 剪 接 运 基因在空间上转移并 成功表达 限制性内切核酸酶 — — “分子手术刀” ◆ 来源：主要是从原核生物中分离纯化来的。 限制酶是一类酶 ◆ 作用：能够①识别双链DNA 分子的特定核苷酸序列，②并且使每一条链中 特定部位的磷酸二酯键断开。 ◆ 结果： G C 识别序列中轴线两侧两条链分别切开 黏性末端 C G Haelll cut C C 识别序列的中轴线两条链分别切开 平末端 C C sticky ends A G C< G kcut C< G T( A A T G C G A T C C C G G cut cut 5′...GA ATTC...3 EcoR I: 3...CTTA AG...5 5′...ACTAGT..3′ Spe I: 3...TGAT CA...5′ 5′...GATATC..3' 3...CT AT AG...5′ 5′...AA GCTT..3' Hind III:3...T TCGAA...5′ ● 特 点 1:都可以找到一 条中 ( 心 ) 轴 线 ； ● 特点2: 中轴线两侧的双 链DNA上的碱基是反向对 称重复排列的，称为回文 序 列。 中轴线 正向读与另一条链反向读的碱基顺序完全一致。 回文序列 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成；也有少数限制酶的识别序列由4个 、8个或其他数量的核苷酸组成。 EcoRV: 限制酶名字的由来 属名Escherichia首字母 R 型菌株 EcoR I 从中分离的第一个限制酶 种名coli 前两个字母 酶的专一性 ■ 推测限制酶存在于原核生物中 的作用是什么 主要起到切割外源DNA 使之失效， 从而达到保护自身的目的。 ■ 为什么限制酶不切割原核生物 自身的DNA 分子 ①含某种限制酶的细菌的DNA分 子不具备这种限制酶的识别 ... ...
