人教版高中生物选修1 专题5 DNA和蛋白质技术《DNA的粗提取和分离》课件 （共25张PPT）

课件25张PPT。讨论2：真核生物的遗传物质存在于哪里？ 讨论3：怎样才能将真核细胞内的遗传物质分离来？ 讨论1：生物体的遗传物质是什么？专题5 DNA和蛋白质技术课题1 DNA的粗提取与鉴定（一）、实验材料的选取： 用什么材料提取DNA？为什么？ （一）实验材料的选取：鸡血细胞做实验材料。原因： 1、鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得 2、鸡血细胞极易吸水胀破 3、植物细胞外有细胞壁，其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液1、若是动物细胞，如何获取DNA滤液？ 2、若是植物细胞，如何获取DNA滤液？旁栏思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 旁栏思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 3、如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解旁栏思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 3、如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等（三）去除滤液中的杂质滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？ （三）去除滤液中的杂质滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？ 可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质。（三）去除滤液中的杂质根据DNA的理化性质，可以用哪些方法来去除滤液中的杂质？ （三）去除滤液中的杂质为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？（注意：两种食盐溶液的浓度和作用）（三）去除滤液中的杂质用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去在低盐溶液中的杂质。因此，反复溶解与析出DNA，就能除去与DNA溶解度不同的多种杂质。为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？（注意：两种食盐溶液的浓度和作用）（四）DNA的析出析出： 滤液+同体积95%冷却酒精 白色丝状物（五）DNA的鉴定 如何鉴定？ 对比反应是为了证明什么？ 原理？ 三、操作提示1.以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻 缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3.二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地析出 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地析出 ⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中⑦除去含DNA的滤液中的杂质⑧提取DNA⑨ A出现蓝色 B无变化此实验过程中有几次过滤，几次析出？分别在哪一步？讨论：答：整个实验共“三次过滤，两次析出”此实验过程中有几次过滤，几次析出？分别在哪一步？讨论：过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层三次过滤第一次： DNA存在于滤液里 第一步 第二次： DNA被留在纱布上 第四步 第三次： DNA存在于滤液里 第六步③两次析出第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液第三步第二次：用冷却的95％的酒精第七步 ... ...