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课件网) 内容要求 4.2 动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合 和干细胞的应用等技术 4.2.1 阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础 4.2.2 阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使重组细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的过程 4.2.3 阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 4.2.4 概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术 4.2.5 简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值 细胞培养 是动物细胞工程的基础 选择性必修3 第三章 动物细胞工程 第一节 动物细胞培养的条件 学习内容 动物细胞培养的过程 动物细胞培养的价值 活动1 鸡胚细胞的原代培养过程 75%酒精擦拭鸡蛋后 用镊子敲碎线内蛋壳 小心去除蛋壳 撕去壳膜 换镊子，取出鸡胚 用Hank’s缓冲液 清洗2次 剪去头、四肢、内脏 保留部分躯干 躯干转移至新培养皿中 剪碎（越小越好） 胰蛋白酶消化 获取鸡胚 分散细胞 活动1 鸡胚细胞的培养过程 为什么要在超净工作台上获取鸡胚？ 确保无菌 获取了鸡的胚胎，如何获得分散的细胞？ 机械消化、胰蛋白酶消化（或胶原蛋白酶） 为什么细胞要分散后进行培养？ 获得充足的营养 思考讨论： 胶原蛋白纤维 活动1 鸡胚细胞的培养过程 75%酒精擦拭鸡蛋、手等的目的是什么？还有哪些措施达成这一目的？ 为什么可以用胰蛋白酶消化，却还要先用剪刀剪碎材料？ 为什么用胰蛋白酶而不采用胃蛋白酶？ 开放式培养的目的是什么？ CO2培养箱有什么作用？ 拧松半圈 CO2培养箱中开放式培养 转移至卡氏瓶中 拧紧盖子 培养观察 24h后倒置显微镜观察 除去胰酶后 加培养液 思考讨论： 请用一句话概括动物细胞培养的过程 动物细胞培养是从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后，在适宜环境下让细胞生长和增殖的过程。 原代培养 活动2 分析动物细胞培养的条件 充足的营养 血清 稳定的环境 无菌 培养基 细胞 CO2培养箱 温度 湿度 pH 渗透压 无毒 关 联 水 氨基酸 糖类 维生素 生长因子 无机盐 无菌操作 更换 NaHCO3 包 括 提 供 保 障 保 障 提 供 动物体细胞可在体外适宜条件下培养 气体条件 7.2～7.4 37℃ 5%CO2 95%空气 抗生素 活动2 分析动物细胞培养的条件 充足的营养 血清 稳定的环境 无菌 培养基 细胞 CO2培养箱 温度 湿度 pH 渗透压 无毒 关 联 水 氨基酸 糖类 维生素 生长因子 无机盐 无菌操作 更换 NaHCO3 包 括 提 供 保 障 保 障 提 供 气体条件 7.2～7.4 37℃ 5%CO2 95%空气 抗生素 动物体细胞可在体外适宜条件下培养 活动3 观察并分析体外培养动物细胞的生长特点 从显微镜观察到的结果分析，动物细胞培养时，细胞生长有什么特点？ 提示： 培养液晃动后，细胞并未散开。 视野中所有细胞均清晰。 成纤维细胞 贴附生长 接触抑制 单层生长 倒置显微镜观察 卡氏瓶 活动4 举例动物细胞培养的价值 航天员在我国空间站天宫的天和核心舱进行细胞学研究，观察失重环境下细胞的生长，观察心机细胞的收缩，这体现了动物细胞培养哪方面的价值？ 心肌细胞的收缩 活动4 举例动物细胞培养的价值 新冠病毒灭活疫苗（Vero细胞）制备中重要的一步是培养Vero细胞（非洲绿猴肾细胞），这体现了动物细胞培养哪方面的价值？ 培养中的Vero细胞 （非洲绿猴肾细胞） 活动4 举例动物细胞培养的价值 价值 观察细胞的 动态变化过程 直接观察分析形态结构 研究生命活动 生理、病理、药理研究 组织器官修复 获取代谢产物 疫苗 理论研究 实际应用 干扰素 单克隆 抗体 活动4 举例动物细胞培养的价值 价值 观察细胞 ... ...
