高频考点34 基因工程 (时间:25分钟 分值:20分) 选择题1~10小题,每小题2分,共20分。 考向一 重组DNA技术的基本工具 1.(2024·四川成都一模)某环状DNA分别用限制酶1和限制酶2完全切割后进行扩增产物的琼脂糖凝胶电泳,结果如图所示(注:kB表示千碱基对数,M代表标准对照)。下列叙述错误的是( ) A.该DNA总长度不可能为14 kB B.该DNA上至少有两个酶1的切割位点 C.该DNA上至少有1个酶2的切割位点 D.同时用酶1和酶2切割该DNA,电泳结果至少呈现两条带 2.(2025·云南联考)研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存,质粒含有抗性基因与酶切位点,目的基因两端酶切位点如下图所示,下列叙述错误的是( ) A.使用Hind Ⅲ和XbaⅠ进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B.目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C.Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性,有利于重组质粒导入受体细胞 D.含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 考向二 基因工程的基本操作程序 3.(2024·九省联考甘肃卷)胰岛素可用于治疗糖尿病,我国科学家打破国外技术垄断,研发了拥有自主知识产权的重组人胰岛素药物,下列叙述错误的是( ) A.用PCR技术扩增人胰岛素基因时,每次循环包括变性、复性、延伸三步 B.构建人胰岛素基因表达载体时,需使用限制性内切核酸酶和DNA连接酶 C.大肠杆菌细胞经Ca2+处理后,更容易吸收重组的人胰岛素基因表达载体 D. 抗原-抗体杂交法不能检测人胰岛素基因表达载体是否导入大肠杆菌细胞 4.(2025·四川绵阳联考)下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是( ) 注:AmpR:氨苄青霉素抗性基因;TetR:四环素抗性基因。 A.用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌 B.应选择的限制酶组合是酶F和酶G C.pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因 D.同时用三种限制酶处理图中质粒,完全反应后可得到4种长度DNA 5.(2025·福建漳州期末)幽门螺杆菌(Hp)感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因,用限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割,通过基因工程制备相应的疫苗,质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是( ) A.Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组 B.基因表达载体导入之前,可用Ca2+处理大肠杆菌 C.培养基A中添加了氯霉素,培养基B中添加了潮霉素 D.能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中 6.(2024·湖北荆州模拟)图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程,其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因,GUS基因仅在真核细胞中表达,表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是( ) A.PCR扩增A时可在引物中加入PstⅠ和XhoⅠ的酶切位点 B.在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C.用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养 D.启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费 考向三 PCR扩增的原理和过程 7.(2025·广东揭阳联考)利用PCR 获得目的基因后,用限制酶EcoRⅠ同时处理目的基因与质粒,拼接后可得到重组基因表达载体,其部分DNA片段如下图所示。下列有关引物的分析正确的是( ) A.通过PCR获取目的基因时,所选的引物可为引物2和引物3 B.检测目的基因是否插入质粒且方向是否正确时,应选用引物1 和引物4进行PCR C.若设计的引物与模板不完全配对,可适当提高 PCR 复性的温度 D.DNA聚合酶能与引物结合,并从引物的5'端连接脱氧核苷酸 8.(2025·江苏南通开学考)hNaDC3(人钠/二羧酸协同转运蛋白-3)主要分布于肾脏等重要器官。为进一步研究hNaDC3的生理功能,科研人员利用基因工程技术构建了绿色荧光蛋白(GFP)基因与hNaDC3基因的融合基因,其过程如图所示。相关叙述正确的是( ... ...
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