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课件网) 首例胚胎移植成功 首创动物组织体外培养法 发现哺乳动物精子获能现象 体细胞核移植成功 试管家兔诞生 创立单克隆抗体技术 胚胎分割移植成功 分离和培养小鼠胚胎干细胞 克隆羊多莉诞生 获得诱导多能干细胞 单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生 我国科学家首次培育了体细胞克隆猴 1890年 1907年 1951年 1958年 1959年 1975年 1978年 1981年 1996年 2006年 2014年 2017年 动物细胞工程的发展历程 第2节 动物细胞工程 本节聚焦: 动物细胞培养需要哪些基本条件？ 动物细胞培养的基本操作过程是什么？ 怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险？ 第二章 细胞工程 一、动物细胞培养（基础） 二、动物细胞融合 三、动物细胞核移植 从社会中来 通过细胞培养构建的人造皮肤 思考： 怎样获得大量的自体健康皮肤？ 能不能用自体皮肤的单个细胞培养可供的移植皮肤？ 烧伤病人图片 异体皮肤移植图片 问题一：体外培育皮肤细胞实际上是在体外模拟体内的生理条件进行的培养，你认为体外培养动物细胞需要满足哪些条件？ 【任务一】如何利用病人健康皮肤培育人造皮肤？ 【思考】 1.内环境中的营养成分有哪些？ 2.内环境的理化性质？ 3.培养动物细胞除了上述2种条件，还需满足哪些条件？ 糖类、氨基酸、无机盐、维生素……（合成培养基） +血清 温度、PH、渗透压 无菌、无毒的环境 气体环境 1.营养 ①气体的组成及作用 O2 CO2 ②培养装置: 培养皿或松盖培养瓶 （含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱。） 置于 维持培养液的pH 细胞代谢所必需 CO2培养箱 总结：细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 3.温度、PH、渗透压 4.气体环境 问题二：若直接培养健康的皮肤组织，组织中的细胞与细胞紧密接触在一起，会限制其生长和繁殖，怎样解决这一问题？ 【任务一】如何利用病人健康皮肤培育人造皮肤？ 【思考】（P44旁栏思考） 1.说明动物细胞间的物质主要是什么成分？ 2.用胃蛋白酶可以吗？ 动物组织 分散成 单个细胞 机械法、胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 蛋白质 不可以，因为胃蛋白酶的最适PH为1.5左右，动物细胞培养的适宜PH为7.2-7.4 问题三：皮肤细胞培养一段时间后，可能出现因有害代谢物积累、营养物质缺乏，而引起细胞分裂受阻的现象，如何避免这样的情况发生？ 【任务一】如何利用病人健康皮肤培育人造皮肤？ 动物组织 分散成 单个细胞 机械法、胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 加培养液 细胞悬液 培养液定时更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累，创造无毒的环境。 问题四：皮肤细胞培养一段时间后，可能出现因细胞密度过大，以及贴壁细胞之间发生接触抑制，而引起的细胞分裂受阻的现象，怎样解决这个问题？ 【任务一】如何利用病人健康皮肤培育人造皮肤？ 【阅读教材P44，回答下列问题】 1.体外培养的动物细胞有哪些类型？ 2.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？ ①悬浮生长细胞：细胞能够悬浮在培养液中生长増殖 ②贴壁生长细胞：细胞需要贴附于某些基质（如培养瓶壁）表面才能增殖（主要类型） ①细胞贴壁：贴壁生长细胞细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。 ②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖。 分瓶培养 细胞贴壁过程 贴壁生长与接触抑制 圆球形细胞刚开始 铺展贴壁生长（100×） 培养的动物细胞贴壁生长 并进行有丝分裂（100×） 细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×） 形成一层细胞 可形成多层细胞 肿瘤细胞失去接触抑制，条件适宜在培养液可以无限增殖下去。 细胞悬液 细胞贴壁、接触抑制 动物 组织块 分散成 单个细胞 机械法 胰蛋白酶 胶原蛋白酶处理 加培养液 细胞悬液 原代培养 传代培养 放入培养瓶 ... ...
