1.2.2微生物的选择培养与计数 课件(共34张PPT1个视频)-2025-2026学年高二下学期《生物》（人教版）选必修3

(课件网) 第2节 微生物的选择培养和计数 第一章 传统发酵技术的应用 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。 如何达成这一目标？ 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 筛选原则 耐寒微生物 耐热微生物 石油分解菌 一、选择培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 ④加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 ③不加含碳有机物的无碳培养基 ②不加氮源的无氮培养基 ①加入青霉素的培养基 选择培养基 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 提出问题：1g土壤中有多少能分解尿素的细菌 土壤取样 制备选择培养基 接种：稀释涂布平板法 微生物的培养与观察 研究思路 探究-实践 (四）土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 尿素的立体结构 稀释涂布平板法 稀释涂布平板法 原理：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 提出问题：1g土壤中有多少能分解尿素的细菌 需对土壤菌液进行稀释及科学的微生物数量测定方法--稀释涂布平板法。 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml ①原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 1.培养基的制备 ②配方： KH2PO4和Na2HPO4的作用是： ①提供无机盐； ②调节pH。 常见的分解尿素的微生物：芽孢杆菌、小球菌、棒状杆菌等细菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。 细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表3-8cm的土壤层。铲去表层土3cm左右，取样，将样品装入事先准备好的信封中。 取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。 操作完成后，一定要洗手。 2.实验设计 土壤取样 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL ①将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。 1ⅹ105 1ⅹ103 1ⅹ102 1ⅹ104 9mL无菌水 1ⅹ107 1ⅹ106 1ⅹ10 90mL无菌水 ②取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 铲取土样，将样品装入纸袋中 稀释涂布平板法： ①样品梯度稀释 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，培养 稀释涂布平板法： ②取样涂布平板 放入37℃恒温箱中培养1～2d 培养与观察 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 空白对照 恒温培养箱 M代表稀释倍数； C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数； V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) 每g样品中的菌落数＝(C÷V)×M 例题1：在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，每g样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) ( ) A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4 B ①计算公式： 1.间接计数法 — 稀释涂布平板法 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1ⅹ105 1ⅹ103 1ⅹ102 1ⅹ104 9mL无菌水 1ⅹ107 1ⅹ106 1ⅹ10 10g土样+ 90mL无菌水 ②原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 统计的结果一般用菌落数表示而不是活菌数； 选择30-30 ... ...