1.2微生物的基本培养技术 （第二课时） 2.酵母菌的纯培养 (1)原理 采用平板划线法和稀释涂布平板法，能将单个微生物分散在固体培养基上后，经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖而形成的菌落。 菌落特征（如大小形状、边缘表面、质地颜色等）是衡量菌种纯度、辨认鉴定菌种的重要依据 (2)材料用具 1配制培养基 (3)方法步骤 称取去皮的马铃薯200g 加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂 向滤液加入20克葡萄糖用玻棒搅拌以加速溶解 分瓶后各加琼脂摇匀，包瓶口并用橡皮筋勒紧 用纱布过滤后，加蒸馏水至1000mL 2灭菌 加棉塞、包牛皮纸、橡皮筋勒紧 培养基装入锥形瓶，加棉塞，包牛皮纸扎紧，高压蒸汽灭菌； 培养皿5～8套作一包，放于干热灭菌箱内灭菌 100KPa121℃下维持15-30min 哪经配制、灭菌的培养基可即给微生物“大餐”了吗，还需要什么环节？请阅读课本P12的图解，了解各步骤的注意问题有哪些？ 经烹调的菜式，需要上盘分餐以便供客人用餐食用 3 倒平板 培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 ①在火焰旁，右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞； 思考1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么 办法来估计培养基的温度？ 可用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 ②右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰 思考2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 ③左手将培养皿打开缝隙，右手将培养基倒入培养皿，即盖上皿盖。 ④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。 思考3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上 会凝结水珠，凝固后 的培养基表面的湿度 也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，造成污染。 1.下列关于制备酵母菌固体培养基的说法,错误的是( ) A.操作顺序为称量、煮沸至软烂、倒平板、灭菌 B.将煮至软烂的马铃薯用纱布过滤至烧杯中 C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D.待平板冷却凝固5~10 min后将平板倒过来放置 A 2.制备酵母菌固体培养基的步骤是( ) A．称量、倒平板、煮沸至马铃薯软烂、灭菌 B．称量、煮沸至马铃薯软烂、倒平板、灭菌 C．称量、煮沸至马铃薯软烂、灭菌、倒平板 D．称量、灭菌、煮沸至马铃薯软烂、倒平板 C 3.制作酵母菌培养基时，倒平板操作的步骤是：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出???????；右手拿锥形瓶，将?????迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的_____倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却??????后，将平板倒过来放置，使??????在下、?????在上。 棉塞 瓶口 培养基 凝固 皿盖 皿底 (1)从成分上来说，该培养基中除了水和无机盐，牛肉膏和蛋白胨为大肠杆菌既能提供?????????，又能提供????????。 (2)培养大肠杆菌前，需要将培养基进行严格的灭菌处理，常用的方法是????????????????。 (3)若大幅度提高培养基中NaCl的含量，可用于筛选耐盐的细菌，这种培养基被称为????????培养基。 4.某兴趣小组制备牛肉膏蛋白胨固体培养基并用来培养大肠杆菌，牛肉膏蛋白胨固体培养基的配方如下表。请分析回答有关问题: 碳源 氮源 高压蒸汽灭菌 选择 （二）接种和分离酵母菌 纯化培养（接种方法） 平板划线法 稀释涂布平板法 培养基“大餐”准备完毕，怎样把微生物客人邀请过来呢？ 为何播种时要逐粒将豆子散播中土中？ ★平板划线法★ 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见 ... ...
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