《创新课堂》第3章第2节 第2课时 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定（教师版）-高中生物学选择性必修3（人教版）同步讲练测

第2课时　将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 [课标内容] 1．阐明将目的基因导入受体细胞的方法。2.阐明目的基因的检测与鉴定的方法。 一、将目的基因导入受体细胞 1．转化：是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持_____的过程。 2．导入植物细胞 (1)花粉管通道法 (2)农杆菌转化法 3．导入动物细胞：利用_____将目的基因注入动物的受精卵中。 受精卵可以发育形成一个完整的动物个体 4．导入微生物细胞：先用_____处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸 通常选用大肠杆菌 收周围环境中DNA分子的生理状态，再将重组的基因表达载体导入大肠杆菌 感受态细胞 细胞中。 二、目的基因的检测与鉴定 导入的目的基因可以存在于细胞质中，也可以整合到染色体DNA上，所以需要检测 1．分子水平检测 2．个体生物学水平鉴定 三、DNA片段的扩增及电泳鉴定 1．DNA片段的扩增 2．PCR扩增产物的电泳鉴定 (1)实验原理 (2)实验步骤 [答案自填] 稳定和表达　目的基因　子房　花粉管通道　Ti质粒　染色体DNA　叶片　农杆菌　花序　显微注射　Ca2＋　mRNA　抗原—抗体杂交　抗虫特性　解聚与结合　30　微量移液器　微量离心管　离心机　反应液　琼脂糖凝胶电泳　凝胶的浓度　DNA分子的大小和构象　紫外灯　琼脂糖　核酸染料　加样孔　电泳缓冲液　加样孔　指示分子大小的标准参照物　指示剂　紫外灯 (1)将重组表达载体导入动物受精卵常用显微注射法。(　　) (2)可通过PCR等技术检测棉花的染色体DNA上是否插入了Bt基因。(　　) (3)Ti质粒上的T-DNA可转移到植物细胞内，并且与其染色体DNA整合在一起。(　　) (4)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测才能达到目的。(　　) (5)检测目的基因是否成功表达可用抗原—抗体杂交技术。(　　) (6)抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达。(　　) 提示：(1)√　(2)√　(3)√　 (4)×　抗虫效果的鉴定要在个体生物学水平上做抗虫接种实验来鉴定。 (5)√　(6)√ 【知识框架】 核心点一　将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。农杆菌能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。下图为利用农杆菌转化法制备转基因植物的过程图，据图回答下列问题： (1)为什么在用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，一定要将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上？ (2)将基因表达载体导入农杆菌细胞时，应怎样处理农杆菌细胞？ (3)在自然条件下，农杆菌转化法为什么是将目的基因导入双子叶植物和裸子植物而非单子叶植物的一种方法？ (4)植物的受精卵或体细胞都可以作为受体细胞，如果将目的基因导入动物细胞，选用体细胞是否可行？ (5)转化的实质是什么？与“肺炎链球菌的转化实验”中的“转化”含义是否相同？ 提示：(1)Ti质粒上的T-DNA也称为可转移的DNA，农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA转移至被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 (2)要用Ca2＋处理农杆菌细胞，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，利于重组质粒的导入。 (3)在自然条件下，农杆菌能侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。 (4)不可行。动物的体细胞分化程度高，全能性受到限制，因此一般采用受精卵作为受体细胞。 (5)基因重组。相同。 1．农杆菌转化法中的两次拼接和两次导入 (1)两次拼接 ①第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上。 ②第二次拼接(非人工操作)是指插入目的基因的T-DNA 被拼接到受体细胞的染色体DNA上。 (2)两次导入 ①第一次导入是将含目的基因的重组Ti质粒转入农杆菌。 ②第二次导入(非人工操作)是指将含重组Ti质粒的农杆菌导入受体细胞。 2．将目 ... ...