《创新课堂》第3章第1节 重组DNA技术的基本工具 讲义（教师版）-高中生物学选择性必修3（人教版）同步讲练测

INCLUDEPICTURE "人教SWXZXBX3第3章LLL.TIF" 第1节　重组DNA技术的基本工具 [课标内容] 1．概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的。2.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。3.活动：DNA的粗提取与鉴定。 INCLUDEPICTURE "课前自主预习LLL.TIF" 一、基因工程 INCLUDEPICTURE "XRXS1.TIF" 二、重组DNA技术的基本工具 1．限制性内切核酸酶(又称限制酶)———�分子手术刀” INCLUDEPICTURE "箭头B.TIF" 具有专一性 INCLUDEPICTURE "XRXS2.TIF" 2．DNA连接酶———�分子缝合针” INCLUDEPICTURE "箭头B.TIF" 不具有特异性 INCLUDEPICTURE "箭头A.TIF" 注意连接的不是氢键 (1)作用：能将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的_____。 (2)类型 类型 E.coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 来源 _____ _____ 两者比较 E.coli DNA连接酶连接具有_____的DNA片段的效率要远远_____T4 DNA连接酶 3.基因进入受体细胞的载体———�分子运输车” (1)种类：质粒、_____、动植物病毒等。 INCLUDEPICTURE "箭头B.TIF" 病毒具有特异性 (2)常用载体———质粒 ①本质：一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞 _____DNA之外，并具有_____能力的_____。 ②特点：a.有一个至多个限制酶切割位点。 INCLUDEPICTURE "箭头E.TIF" 供外源DNA片段(基因)插入其中 b.携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行_____，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。 c．经人工改造后，这些_____上常有特殊的_____，如四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等。 INCLUDEPICTURE "箭头B.TIF" 便于重组DNA分子的筛选 (3)特点：不同载体的来源不同，在_____、_____、_____以及可以插入外源DNA片段的_____上也有很大差别。 三、DNA的粗提取与鉴定 INCLUDEPICTURE "XRXS5.TIF" [答案自填] DNA分子　转基因　遗传特性　生物类型　基因重组　原核生物　数千　特定核苷酸序列　磷酸二酯键　黏性末端　平末端　磷酸二酯键　大肠杆菌　T4噬菌体　平末端　低于　噬菌体　拟核　自我复制　环状双链DNA分子　自我复制　质粒　标记基因　大小　结构　复制方式　大小　蛋白质　2 mol/L　蓝色 INCLUDEPICTURE "自查自纠LLL.TIF" (1)基因工程的原理是基因重组，此变异是定向的。(　　) (2)重组DNA技术所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体。(　　) (3)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键，形成重组DNA。(　　) (4)DNA连接酶能将断开的氢键连接起来。(　　) (5)在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。(　　) (6)洋葱研磨液经纱布过滤后，应在－4 ℃冰箱中放置几分钟。(　　) 提示：(1)√ (2)×　工具酶为限制酶和DNA连接酶。 (3)×　DNA连接酶可以连接目的基因与载体的磷酸二酸键，形成重组DNA。 (4)×　DNA连接酶能恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。 (5)√ (6)×　洋葱研磨液经纱布过滤后，应在4 ℃冰箱中放置几分钟。 【知识框架】 INCLUDEPICTURE "F59.TIF" INCLUDEPICTURE "课堂合作探究LLL.TIF" 核心点一　基因工程的基本工具———工具酶 INCLUDEPICTURE "问题探究LLL.TIF" [探究1] 切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。 (1)推断限制酶切割一次可断开几个磷酸二酯键？产生多少游离的磷酸基团？产生几个末端？ (2)黏性末端和平末端是如何形成的？限制酶的识别序列有什么特点？ (3)写出下列限制酶切割形成的黏性末端。同种限制酶切割产生的黏性末端是否相同？不同限制酶切割产生的黏性末端是否一 ... ...