课题3 分解纤维素的微生物的分离 课型：新授课 使用人： 使用时间： 班级： 小组： 【学习目标】 1．能简述纤维素酶的种类及作用。 2．说出刚果红染色法及其原理。 3．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。 【重点难点】 1．能简述纤维素酶的种类及作用。 2．说出刚果红染色法及其原理。 【学习流程】 【自主学习一】： （一）纤维素与纤维素酶 (1)纤维素是一种由_____首尾相连而成的_____化合物，是含量最丰富的_____类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中_____是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生_____ _。 (2)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_____、_____和_____，前两种酶使纤维素分解成_____，第三种酶将_____分解成葡萄糖。 思考： 构成纤维素和纤维素酶的单体分别是 和 。 （二）纤维素分解菌的筛选 (1)筛选纤维素分解菌的方法是_____法。该方法可以通过_____反应直接筛选。 (2)筛选原理：刚果红是一种_____，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成_____，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被_____分解后，_____ _____无法形成，出现以_____为中心的_____，我们可以通过_____ _____来筛选纤维素分解菌。 思考：纤维素分解菌的代谢类型 【自主学习二】： 分离分解纤维素的微生物的实验设计 1．土壤取样 采集土样时，应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。根据生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中_____的含量相对提高，因此，从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 2．选择培养 (1)目的：增加纤维素分解菌的_____，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 (2)操作方法：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在_____上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变_____。也可重复选择培养。 (3)纤维素分解菌选择培养基属于_____培养基，原因是_____。培养基选择作用机制是以_____为唯一碳源，只有_____才能生存。若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是_____。 3．梯度稀释:依次将培养液稀释101～107倍。 4．将样品涂布到_____纤维素分解菌的培养基上。 常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养_____，再加入_____进行颜色反应，另一种是在_____时就加入刚果红。挑选产生_____的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 ★课题延伸 1．为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____实验，纤维素酶的发酵方法有_____发酵和_____发酵。 2．纤维素酶测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_____含量进行定量测定。 思考： 人体内环境中是否含有纤维素？血液中的葡萄糖可来源于纤维素的水解吗？ 【合作探究】 （一） 两种刚果红染色法比较 比较项目 操作方法 优点 缺点 方 法 一 先培养 再加入 显示出的颜色反应基本上是 的 作用 操作繁琐；刚果红会使菌落之间发生 方 法 二 时就加入 操作 ，不存在菌落混 杂问题 产生 的微生物也产生模糊 透明圈；有些微生物能降解 ，形成明显的透明圈 思考：方法一中NaCl的作用 。 例1:下列对于刚果红染色法的叙述，不正确的是( ) A．可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 B．可以在倒平板时就加入刚果红 C．既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红 D．可以将刚果红与培养基中其他物质一起放入培养基后再灭菌倒平板 【二】 纤维素分解菌的选择培养基和鉴别培养基的比较 项目 物理性质 微生物的生长情况 目的 纤维素 分解菌 的 ... ...
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