课件25张PPT。章末整合提升第一部分 微生物的利用梳理知识 构建纲要整合重点 提升技能内容索引梳理知识 构建纲要整合重点 提升技能突破1 划线分离法和涂布分离法的比较两种分离法的易错点拨 (1)在稀释涂布平板操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果。 (2)每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板，作为实验重复，求平均值，若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者，应舍弃该实验数据，不进行统计、计算。 (3)平板冷凝后，皿盖上会凝结成水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基中造成污染。1.微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题：(1)下图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为 。 (2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_____ _____。答案倒平板将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(3)下图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→_____ (用字母和箭头表示)； 找出图乙中两处错误的操作： 、 (用字母表示)。答案G→F→E→C→D→HC D(4)下图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基培养12 h后的实验结果，如果培养基上_____ _____，则说明无菌操作基本符合要求。答案生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点突破2 培养基的配制和无菌技术1.培养基的制备(以LB固体培养基为例) 计算→称量→融化→灭菌→倒平板。 2.无菌技术 (1)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法等，对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。 (2)微生物培养时获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下内容： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料、用具与周围的物品相接触。 3.倒平板操作 待培养基冷却至60 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，严格遵循教材上的操作步骤。 4.划线分离法 划线分离法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。5.涂布分离法 先将菌液进行系列稀释，然后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分解成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。2.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答下列相关问题： (1)图甲是利用 法进行微生物接种，图乙是利用 法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是 和 ；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是 和酒精消毒。答案解析划线分离涂布分离接种环玻璃刮刀灼烧灭菌解析 图甲和图乙分别是划线分离法和涂布分离法，这两种方法所用的接种工具分别是接种环和玻璃刮刀。由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域，因此接种常在火焰附近进行。在微生物培养过程中会产生水，对微生物的生长造成影响，故需要倒置培养。(2)接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？ 。 (3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？ 。答案火焰附近存在着无菌区域避免培养过程产生的水分影响微生物的生长答案(4)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是_____ (填“图甲”或“图乙”)。图乙突破3 微 ... ...
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