课件34张PPT。干细胞工程胚胎干细胞的研究及其应用 细胞是机体组成的基本单位一、什么是干细胞？ 干细胞（Stem cell）即起源细胞。在细胞的分化过程中，细胞往往由于高度化分而完全失去了再分裂的能力，最终衰老死亡。机体在发展适应过程中为了弥补这一不足，保留了一部分未分化的原始细胞。 因此，干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。1.形态特征和生化特征 形态特征—圆形或椭圆形，核质比大； 生化特征—较高的端粒酶活性。 2.增殖特征 增殖的缓慢性 增殖的自稳性（区别与肿瘤细胞的本质特征）干细胞的主要特征：全能干细胞 多能干细胞 单能干细胞按分化潜能按发育状态胚胎干细胞 成体干细胞干细胞的分类人类干细胞的来源成人细胞或脐血(骨髓和血)/胎儿组织(专能/多能)。 人工流产后的人类胎儿生殖组织(全能)。 通过体外授精产生的人类胚胎，治疗不育症的夫妇不再需要(全能)。 用捐赠者的配子通过体外授精创造的人类胚胎(全能)。女性供卵要非常慎重。 通过体细胞核转移技术(克隆技术)产生的人类胚胎(全能)。 以上都必须获得当事人的知情同意。成体干细胞 成年动物的许多组织和器官，比如表皮和造血系统，具有修复和再生的能力。成体干细胞在其中起着关键的作用。在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。 造血干细胞是体内各种血细胞的唯一来源，它主要存在于骨髓、外周血、脐带血中。 造 血干细胞的移植是治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性转移性肿瘤疾病的最有效方法。 与骨髓移植和外周血干细胞移植相比，脐血干细胞移植的长处在于无来源的限制，对HLA配型要求不高，不易受病毒或肿瘤的污染。造血干细胞 骨髓；1/400 外周血；1/100000 脐带血；1/10000 胎儿造血系统； 胚胎干细胞和胚胎生殖细胞。造血干细胞的来源1.移植前处理 超大剂量的放疗、化疗尽量消灭肿瘤细胞，同时抑制患 者的免疫系统，使供体者的造血干细胞可以顺利植入。 2.采集供体者的造血干细胞（骨髓、外周血、脐带血）， 并与受体进行HLA配型； 3.将造血干细胞输入到受体者体内，造血干细胞会自动定 居到脊髓。造血干细胞的移植三.胚胎干细胞1.概念:简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞. 2.特点: 1)形态:体积小.细胞核大,核仁明显. 2)功能:具有发育的全能性.可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.体外培养可增殖不分化. 3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。胚胎干细胞ES细胞是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。研究和利用ES细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。胚胎干细胞衍生自囊胚的内细胞团或原始外胚层的细胞； 永生化(immortal)； 能维持稳定的正常的二倍体染色体结构； 有稳定的发育潜能，能被诱导增殖或分化； 能参与胎儿所有组织的发育过程；胚胎干细胞的性质形态特征 体积小、核大，有一个或多个核仁； 胚胎干细胞克隆紧密堆积，无明显的界限，形似鸟巢 生化特征 具有碱性磷酸酶和端粒酶活性； 表达SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60等； 表达OCT-4蛋白； 无X染色体失活。胚胎干细胞的形态和生化特征胚胎干细胞的分离酶消化后培养 免疫方法去除滋养层细胞 流式细胞仪分离法胚胎干细胞系的建立过程胚胎干细胞的培养 胚胎干细胞的诱导分化： 胎牛血清，骨髓基质细胞共培养 胚胎干细胞－－－－－－－－－－－－－－－?造血细胞 RA 胚胎干细胞－－－－－－－－－－－－－－－? ... ...
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