酵母细胞的固定化 一、固定化酶的应用实例———高果糖浆的生产 1．反应原理：葡萄糖葡萄糖异构酶,果糖。 2．生产过程 二、固定化酶和固定化细胞技术 1．概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 2．固定方法[连线] 3．常用载体：包埋法固定化细胞常用的是不溶于水的多孔性载体，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。 4．优点 (1)固定化酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用。 (2)固定化细胞制备成本更低，操作更容易。 三、固定化酵母细胞的实验操作 1．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。 2．配制海藻酸钠溶液时，要使用小火或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止。 3．溶化好的海藻酸钠溶液要先冷却至室温，再加入已活化的酵母细胞。 4．在CaCl2溶液中形成的凝胶珠需在CaCl2溶液中浸泡30_min左右。 1．制备固定化酵母细胞，常用的载体和固定方法依次是( ) A．海藻酸钠、化学结合法 B．氯化钙、物理吸附法 C．海藻酸钠、包埋法 D．氯化钙、化学结合法 解析：选C 酵母细胞体积大，难以用化学结合法和物理吸附法，宜采用包埋法固定。固定化细胞应当选用不溶于水的多孔性载体材料，常用的是海藻酸钠。 2．海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要通过加热促进其溶解，采用的最好的加热方法是( ) A．快速加热 B．持续高温加热 C．小火或间断加热 D．灼烧加热 解析：选C 溶解海藻酸钠时需加热，旨在加速其溶解，但是务必要避免温度过高，使其焦糊，应用小火或间断加热。 3．下面制备固定化酵母细胞的正确步骤是( ) ①配制CaCl2溶液 ②配制海藻酸钠溶液 ③海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 ④酵母细胞的活化 ⑤固定化酵母细胞 A．①②③④⑤ B．④①③②⑤ C．④⑤②①③ D．④①②③⑤ 解析：选D 制备固定化酵母细胞的正确步骤为酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。 4．目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是( ) A．酶对有机溶剂不敏感，但对高温、强酸、强碱非常敏感 B．加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境 C．固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性 D．酶的催化功能很强，但需给予适当的营养物质才能较长时间维持其作用 解析：选C 酶对有机溶剂也非常敏感；普通洗衣粉中含有P，更容易污染环境；酶发挥催化作用时不需要提供营养物质。 5．酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛应用于各个领域，下列叙述正确的是( ) A．用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶，但嚼服后会失去疗效 B．固定化酵母细胞的常用方法是吸附法，这种方法对酵母细胞活性影响最小 C．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度、溶解氧和营养条件 D．固定化细胞用于生产胞外酶和分泌到胞外的产物 解析：选A 消化酶的本质是蛋白质，能被消化道中的水解酶水解；固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法；固定化酶的应用中，不需要营养条件且与溶解氧无关，但要控制好pH、温度；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，无分泌到胞外的产物。 1．固定化酶或固定化细胞的方法 名称 原理 图示 包埋法 将酶或微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中，分为凝胶包埋法和微囊化法 化学结 合法 利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上，分为交联法、共价结合法、离子结合法 物理吸 附法 通过物理吸附作用，把酶或细胞固定在醋酸纤维素、琼 ... ...
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